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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细菌RNA提取如何配制TE 和溶菌酶
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小爪冰凉

金虫 (小有名气)

[求助] 细菌RNA提取如何配制TE 和溶菌酶 已有1人参与

现在在做细菌的RNA提取。第一步要用溶菌酶裂解菌体，试剂盒的说明书里用TE溶解溶菌酶。但没给出TE的配方。还有在配TE时要用DEPC水吗，但是DEPC与Tris有反应。不知怎么配制了
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1楼 2013-07-23 17:40:53
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muyuanqian

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小爪冰凉(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-23 21:35:08
DEPC水其实是DEPC treated water，DEPC处理后高温高压就被分解了
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2楼2013-07-23 19:46:25
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muyuanqian

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
小爪冰凉: 金币+1 2013-08-04 12:03:34
另外，溶菌酶最好现用现配
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3楼2013-07-23 19:47:36
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小爪冰凉

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by muyuanqian at 2013-07-23 19:47:36
另外，溶菌酶最好现用现配

就是说在配制之前要把DEPC水高压吗，调PH的酸碱液也使用DECP水配吗
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4楼2013-07-23 22:00:11
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huayueyang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-04 00:08:20
DEPC易致癌，且与tris反应。建议用其无毒替代品，外源RNA酶清除剂。TE成分容易和镁离子络合，影响PCR，建议用DEPC水溶解就行。
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坚持！
5楼2013-08-04 00:04:12
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小爪冰凉: 金币+1 2013-08-04 12:03:59
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小爪冰凉 at 2013-07-23 22:00:11
就是说在配制之前要把DEPC水高压吗，调PH的酸碱液也使用DECP水配吗...

将DEPC加入水中，混匀，过段时间后，再将其高压灭菌就好！个人觉得与其这样，还不如直接液氮研磨破碎！方便快捷，还高效！！
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互助互励，共奋共进！！
6楼2013-08-04 09:16:11
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汪婷婷326

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

TE直接到公司买吧，很便宜的三四十块钱。其实就是溶菌酶Buffer,不用担心DEPC跟其反应，我们都这么做的，没什么影响
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7楼2015-12-31 21:29:15
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