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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TE buffer的配制问题
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Hi小木虫

新虫 (小有名气)

[求助] TE buffer的配制问题

具体要配的东西是
TE buffer (30 mM Tris·Cl, 1 mM EDTA, pH 8.0) containing 15 mg/ml lysozyme
用于细菌总RNA的提取，跪求高人指点

[ Last edited by amisking on 2012-7-16 at 20:18 ]
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1楼 2012-07-16 11:57:09
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tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的什么问题呀，细菌提取RNA加点溶菌酶就可以了。
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coasttocoast。
2楼2012-07-16 12:33:55
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Hi小木虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tupac225 at 2012-07-16 12:33:55
你的什么问题呀，细菌提取RNA加点溶菌酶就可以了。

不是，我要提的是肠道内容物的总RNA，买了个试剂盒，要配TEbuffer
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3楼2012-07-16 16:05:26
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tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

《分子克隆》上都有，这些配方的。你们实验室应该有这本书吧。
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coasttocoast。
4楼2012-07-16 17:30:36
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-16 20:18:16
Hi小木虫: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-20 23:07:15
一般是配置1MTris·Cl,   0.5M EDTA, pH 8.0。如果TE的PH是8.0，那么Tris·Cl也是。你要配置的浓度是要计算，看看这两个溶液的添加量分别是多少，可以使其达到终浓度。溶菌酶同样的道理。这个在宝生物的产品目录里面应该有。祝好运。
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5楼2012-07-16 18:13:18
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碧海椰树

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先配置1MTris·Cl,   0.5M EDTA, pH 8.0。然后稀释至终浓度10mMtrisCl 和1mMEDTA，调成pH 8.0即可。我是这样做的
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6楼2012-07-17 10:27:21
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碧海椰树

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一定要用DEPC水配置，因为你是提RNA的。
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7楼2012-07-17 10:28:17
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flyinglife

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-18 13:35:33
你可以算出需要的Tris Cl、EDTA及lysome的质量，然后称量好溶于milli-Q的的水中就可以了啊
提醒一下 EDTA溶解的比较慢 多等一会就好
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心灵的强大才是真的强大
8楼2012-07-18 08:45:22
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Hi小木虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by flyinglife at 2012-07-18 08:45:22
你可以算出需要的Tris Cl、EDTA及lysome的质量，然后称量好溶于milli-Q的的水中就可以了啊
提醒一下 EDTA溶解的比较慢 多等一会就好

分子克隆里边说配制EDTA溶液时，要加固体NaOH而且量很多，我感觉，一起加里边的话，不能溶就麻烦了
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9楼2012-07-19 17:23:04
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Hi小木虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 碧海椰树 at 2012-07-17 10:28:17
一定要用DEPC水配置，因为你是提RNA的。

嗯，买了RNase-free 的水，也买了新的药品，不知道固体药品会不会有RNase 污染
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10楼2012-07-19 17:25:02
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