PCR扩增DNA序列无条带 - 分子生物 - 综合其他 - 第5页小木虫论坛-学术科研互动平台

41楼2014-05-06 18:01:28

王萌萌1992

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你好，请问你电泳模板时候，模板DNA的浓度有要求吗？需要稀释或者加什么buffer或者染色剂吗？另外需要把引物稀释到什么浓度进行电泳排除这些原因的？我是新手，谢谢赐教

42楼2014-10-13 21:22:52

夏财神

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42楼: Originally posted by 王萌萌1992 at 2014-10-13 21:22:52
你好，请问你电泳模板时候，模板DNA的浓度有要求吗？需要稀释或者加什么buffer或者染色剂吗？另外需要把引物稀释到什么浓度进行电泳排除这些原因的？我是新手，谢谢赐教

需要加Loading Buffer吧，电泳按道理不需要控制浓度。做PCR的时候各项浓度按照买来酶的说明书弄就好了～

43楼2014-10-20 02:08:39

王萌萌1992

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43楼: Originally posted by 夏财神 at 2014-10-20 02:08:39
需要加Loading Buffer吧，电泳按道理不需要控制浓度。做PCR的时候各项浓度按照买来酶的说明书弄就好了～...

谢谢~

44楼2014-10-21 09:39:21

lu2010cn

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谢谢楼主。我PCR卡在这里一个多月了，被老板骂了好多回。

走自己的路，让别人说去吧~~

45楼2015-08-22 08:21:24

LYforever

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36楼: Originally posted by hyc_charles at 2013-07-22 18:42:26
楼主，我可以告诉你一个秘密，其实你做了一段时间的PCR以后你会发现，有些模板和引物，不论你如何调整PCR条件，不论你如何更换试剂，你都无法P出你要的目的条带，或者时有时无。我不知道大家有没有这种感受，我曾经 ...

请问你放了多久重新做出来了啊？

46楼2015-11-30 14:48:29

季丹

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我也出现了此问题普通DNA提取，用的天根的试剂盒，然后出现了个别模板，COI 进行PCR 电泳跑胶都没有条带，扩增CYTB 无条带的更多一些。重新进行模板的提取，再次进行扩增依旧如此。其他模板扩增均正常，想不出哪里出了问题。

Happinessisajourney

47楼2018-11-07 20:07:42