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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 植物体内H2O2含量的测定（要分光光度法）
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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 植物体内H2O2含量的测定（要分光光度法）已有1人参与

求植物体内H2O2含量的测定（要KI分光光度法），最后测定波长为390nm下的，包括H2O2标准曲线的制作，最后的计算公式，如有相应的参考文献就更好啦。谢谢，不胜感激
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
1楼2013-07-16 13:36:23
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
植物H2O2含量通过KI法测定，方法参考Sergiev等（1997）报道。称取样品0.500 g，在5 ml 0.1%（w/v）三氯乙酸中冰浴研磨，匀浆在4℃下12000 r/min离心15 min。取上清液0.5 ml，与0.5 ml 0.1 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液、1 ml 1 mol/l KI溶液混合，于室温黑暗下静置1 h后，测定390 nm处吸光度。H2O2含量通过标准曲线计算。

Sergiev I, Alexieva V, Karanov E. Effect of spermine, atrazine and combination between them on some endogenous protective systems and stress markers in plants[J]. Compt Rend Acad Bulg Sci, 1997, 51: 121-124
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2楼2013-07-16 16:11:37
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a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-16 16:11:37
植物H2O2含量通过KI法测定，方法参考Sergiev等（1997）报道。称取样品0.500 g，在5 ml 0.1%（w/v）三氯乙酸中冰浴研磨，匀浆在4℃下12000 r/min离心15 min。取上清液0.5 ml，与0.5 ml 0.1 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液 ...

非常谢谢，我想问问测得的吸光度和已知的H2O2之间是一个什么换算关系呢？比如，测O2-时，测得的吸光度后，根据已知的NO2-标准曲线算出一个数值，这个数值再乘以2就是O2-的量
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2013-07-16 21:32:47
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by a71840584 at 2013-07-16 21:32:47
非常谢谢，我想问问测得的吸光度和已知的H2O2之间是一个什么换算关系呢？比如，测O2-时，测得的吸光度后，根据已知的NO2-标准曲线算出一个数值，这个数值再乘以2就是O2-的量...

直接根据你做标准曲线时使用的H2O2量确定
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4楼2013-07-16 22:00:18
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草溪河

铁虫 (著名写手)
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2楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-16 16:11:37
植物H2O2含量通过KI法测定，方法参考Sergiev等（1997）报道。称取样品0.500 g，在5 ml 0.1%（w/v）三氯乙酸中冰浴研磨，匀浆在4℃下12000 r/min离心15 min。取上清液0.5 ml，与0.5 ml 0.1 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液 ...

请问能分享下这份文献吗？好像在网上不好找。谢谢
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5楼2013-07-17 13:18:38
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 草溪河 at 2013-07-17 13:18:38
请问能分享下这份文献吗？好像在网上不好找。谢谢...

这篇文献我现在手头也没有了，不过可以参考这个
Oxidative stress and some antioxidant systems in acid rain-treated bean plants: Protective role of exogenous polyamines
V Velikova , I Yordanov, A Edrev
Plant Science Volume 151, Issue 1, 7 February 2000, Pages 59–66
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6楼2013-07-18 18:32:28
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草溪河

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-16 16:11:37
植物H2O2含量通过KI法测定，方法参考Sergiev等（1997）报道。称取样品0.500 g，在5 ml 0.1%（w/v）三氯乙酸中冰浴研磨，匀浆在4℃下12000 r/min离心15 min。取上清液0.5 ml，与0.5 ml 0.1 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液 ...

还有个问题请教一下，在您的方法中，植物叶片中的叶绿素的色素对吸光度（即结果）有影响吗？或者怎样设置空白对照？谢谢
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7楼2013-07-18 22:29:33
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 草溪河 at 2013-07-18 22:29:33
还有个问题请教一下，在您的方法中，植物叶片中的叶绿素的色素对吸光度（即结果）有影响吗？或者怎样设置空白对照？谢谢...

影响不大，加入到最终反应体系中的色素很少
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8楼2013-07-18 22:40:16
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925169764

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

大神，求指导，过氧化氢的标准曲线怎么做啊，我一直做不出来啊，吸光度都差不多
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9楼2014-05-22 23:00:32
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925169764

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-18 22:40:16
影响不大，加入到最终反应体系中的色素很少...

楼主，求指导，过氧化氢的标准曲线怎么做啊，我一直做不出来啊，吸光度都差不多，拜托啦
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10楼2014-05-22 23:01:18
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