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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 植物体内H2O2含量的测定(要分光光度法) 已有1人参与

求植物体内H2O2含量的测定(要KI分光光度法),最后测定波长为390nm下的,包括H2O2标准曲线的制作,最后的计算公式,如有相应的参考文献就更好啦。谢谢,不胜感激
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starseacow

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【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 草溪河 at 2013-07-18 22:29:33
还有个问题请教一下,在您的方法中,植物叶片中的叶绿素的色素对吸光度(即结果)有影响吗?或者怎样设置空白对照?谢谢...

影响不大,加入到最终反应体系中的色素很少
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8楼2013-07-18 22:40:16
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starseacow

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
植物H2O2含量通过KI法测定,方法参考Sergiev等(1997)报道。称取样品0.500 g,在5 ml 0.1%(w/v)三氯乙酸中冰浴研磨,匀浆在4℃下12000 r/min离心15 min。取上清液0.5 ml,与0.5 ml 0.1 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液、1 ml 1 mol/l KI溶液混合,于室温黑暗下静置1 h后,测定390 nm处吸光度。H2O2含量通过标准曲线计算。

Sergiev I, Alexieva V, Karanov E. Effect of spermine, atrazine and combination between them on some endogenous protective systems and stress markers in plants[J]. Compt Rend Acad Bulg Sci, 1997, 51: 121-124
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2楼2013-07-16 16:11:37
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-16 16:11:37
植物H2O2含量通过KI法测定,方法参考Sergiev等(1997)报道。称取样品0.500 g,在5 ml 0.1%(w/v)三氯乙酸中冰浴研磨,匀浆在4℃下12000 r/min离心15 min。取上清液0.5 ml,与0.5 ml 0.1 mol/l pH 7.0磷酸钾缓冲液 ...

非常谢谢,我想问问测得的吸光度和已知的H2O2之间是一个什么换算关系呢?比如,测O2-时,测得的吸光度后,根据已知的NO2-标准曲线算出一个数值,这个数值再乘以2就是O2-的量
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2013-07-16 21:32:47
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by a71840584 at 2013-07-16 21:32:47
非常谢谢,我想问问测得的吸光度和已知的H2O2之间是一个什么换算关系呢?比如,测O2-时,测得的吸光度后,根据已知的NO2-标准曲线算出一个数值,这个数值再乘以2就是O2-的量...

直接根据你做标准曲线时使用的H2O2量确定
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4楼2013-07-16 22:00:18
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