| 查看: 1704 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求助：荧光光谱在乙醇和水中差别极大
|
||
我们测试一个荧光探针的荧光性质，发现它在乙醇中的荧光强度很高，0.5uM浓度时，激发波长450nm，最大发射波长为500nm，荧光强度为500多。 当该探针在以水作溶剂时，荧光光谱差别很大。5uM浓度时，500nm处的荧光强度只有150左右，而与此同时，激发光波长附近的荧光强度则>10000，超过了仪器的检测限。（这两个实验的仪器的参数基本相同，除了发射波长差了几个nm）  由于该探针在水中溶解性不好，我们配溶液的时候，是用少量DMSO助溶，然后加入到水中的，这样配制的5uM的探针水溶液未发现浑浊。但其荧光光谱中激发波长450nm处的荧光值增加那么多，而500nm处的荧光强度下降极大，到底是什么原因呢？请各位大侠指教~ 另附这两个溶液的紫外光谱。   |
回复此楼» 猜你喜欢
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有16人回复
-
求个博导看看
已经有19人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光光谱中量子产率怎么算，急
已经有14人回复
- 求助origin如何画三维荧光光谱图
已经有25人回复
- 怎样测定物质的荧光光谱
已经有5人回复
- 普通分光光度计、荧光分光光度计和荧光光谱仪的区别
已经有4人回复
- 求助荧光光谱仪和荧光分光光度计有何异同？
已经有3人回复
- 【求助】求解释：荧光光谱法研究变性剂对蛋白质构象影响，峰强变而峰位不发生变化的可
已经有7人回复
- 【求助】共振光散射法和荧光光谱法有什么区别？如何测共振光散射光谱？
已经有8人回复
- 【求助】荧光光谱仪狭缝和强度的关系
已经有16人回复
- 【求助】三维荧光光谱
已经有12人回复
- 【求助】G09荧光光谱例子 运行出错
已经有25人回复
- 【求助】测试荧光光谱用的仪器
已经有10人回复
- 【求助】紫外光谱和荧光光谱的区别
已经有6人回复
- 【讨论】原子发射光谱法和原子荧光光谱法的区别是什么？
已经有10人回复
- 【求助】关于荧光光谱上的倍频峰
已经有17人回复
- 【求助】在岛津的荧光仪上做同步荧光光谱
已经有8人回复
- 【求助】荧光光谱峰是什么样的？
已经有21人回复
- 【求助】如何减小或消除荧光光谱上的散射信号干扰
已经有6人回复
yangxiaohai
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 5819.4
- 散金: 2299
- 红花: 8
- 帖子: 286
- 在线: 66.3小时
- 虫号: 470231
- 注册: 2007-11-29
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
dairy: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-16 15:47:12
感谢参与，应助指数 +1
dairy: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-16 15:47:12
|
(1)不同溶剂中，物质的荧光性质不同，是一件很正常的事情。因为物质溶于溶剂后就会溶剂化，我们得到的光谱其实并非是单纯该物质的光谱。求助者不提供荧光探针的结构，无法给出更为详细的回答。 (2)荧光光谱的测量上有点小问题。对于普通的荧光测量而言，激发波长小于发射波长，我们记录荧光发射光谱时，发射光谱的波长起始位置，一般比激发波长大10-20 nm。激发光波长附近的强峰，主要是样品（包括样品池）对激发光的散射造成的，难以反映样品本身的荧光特性。 (3)求助者的实验设计有点问题。要比较不同情况下的光谱，样品浓度应尽量一致，避免自吸收、分子间相互作用造成的影响。 |
2楼2013-07-15 23:13:02
yangxiaohai
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 5819.4
- 散金: 2299
- 红花: 8
- 帖子: 286
- 在线: 66.3小时
- 虫号: 470231
- 注册: 2007-11-29
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
dairy: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-07-16 21:48:42
release53: 金币+2, 感谢交流，谢谢提供帮助，欢迎常来分析版 2013-07-18 16:46:28
dairy: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-07-16 21:48:42
release53: 金币+2, 感谢交流，谢谢提供帮助，欢迎常来分析版 2013-07-18 16:46:28
|
是否是因为探针水溶性差，在水中聚集成簇，所以散射光强度很高？有可能 聚集成簇的胶束溶液和均匀分散的溶液在紫外吸收上是否都符合蓝波比尔定律？这个自然，但是摩尔吸光系数会不同。因为光吸收公式中，溶质被看作质点，胶束和游离分子是不同的质点 如何确证该荧光探针在水中荧光强度下降极大是其在水中分散不好所致？这个不太容易，估计要结合荧光寿命的检测来验证 |
4楼2013-07-16 19:19:03