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有人做过AB-APS染色吗?我染不出来不知道是什么原因,大家帮帮忙!
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| 阿里新兰里加入了别的什么东西吗? |
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我的具体操作如下,希望大家能帮帮我 一、步骤: 1. 石蜡脱蜡至水,蒸馏水洗 2. 1%阿里新兰醋酸水溶液10-15分钟 3. 蒸馏水洗30秒 4. 高碘酸溶液6分钟 5. 蒸馏水洗2次,每次30秒 6. Schiff试剂6分钟 7. 0.5%偏重亚硫酸钠 洗2次,每次1-2分钟 8. 流水冲洗5-10分钟 9. 蒸馏水洗2分钟 10. Harris苏木精染色5分钟 11. 自来水冲洗返蓝 12. 脱水透明封片 二、步骤改进: 1. 石蜡切片脱蜡至水,蒸馏水洗 2. 3%醋酸2分钟 3. Ph2.5AB染色30-60分钟(60度和常温都做过)(3%醋酸冲洗) 4. 蒸馏水洗2分钟 5. 3%醋酸洗2分钟 6. 蒸馏水洗2分钟 7. 高碘酸7分钟 8. 流水冲洗5分钟 9. 蒸馏水洗2分钟 10. Schiff试剂5分钟 11. 0.5%偏重亚硫酸钠 洗3次,每次3分钟 12. 流水稍微冲洗(流水冲洗超过3分钟,片子变成红色,完全失去蓝色) 13. 蒸馏水洗 14. Harris染色5分钟,返蓝 15. 脱水透明 每次都是阿里新兰染不出来,步骤一是刚开始有阿里新兰的染色效果,等到染schiff时,蓝色消失,后改进后,在染harris时蓝色消失,曾经把步骤二里的步骤12去掉,效果一样,最终没有蓝色,只有红色,把所有流水冲洗的去掉(流水偏碱性),效果一样,没有蓝色 其他染色正常。 曾经单独染过阿里新兰,染10张只有1张在准确位置染色,其它都没有在准确位置表达,在该染上色的地方没有染上,猜测是可能阿里新兰的配法有问题或者染色方法有问题, 阿里新兰1g,蒸馏水97ml,冰醋酸3ml,ph2.5和1,但是没染出来,请问是步骤有问题还是试剂配的有问题? |
2楼2013-07-09 17:00:49














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