应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跑电泳的一点小疑问
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知（长期有效）
52/1返回列表
查看: 2837  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

pandashu1988

铁虫 (初入文坛)

[求助] 跑电泳的一点小疑问

跑电泳时点样先加buffer还是DNA样本？
师兄说最好是把凝胶放在缓冲液里面点样，有什么好处？

下面是小生酶切DNA后跑电泳的图，先buffer后DNA，从右往左点样的，为什么buffer的带子右边的会比左边的跑的更前呢？还有大神们能看看哪个孔跑的片段更接近300~900bp,还是看不出来？额~
跑电泳的一点小疑问
jh 2013-07-03 19 小时 24 分钟_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2013-07-03 20:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pandashu1988

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by grape_vine at 2013-07-04 14:43:12
你这个DNA切开了也不可能出现特异的条带阿! 我觉得DNA切出来就是这个样子的，各种大小的片段都有啊，你要是切的久一点，整个带会向下偏移，但是我还没见到过直接就酶切DNA然后看到条带的。...

之前DNA提出来直接酶切会在250~750bp之间出现明亮的片段，可以看到。
但是把DNA割胶回收之后再酶切就这个样子了，因为DNA提出来之后跑电泳会有拖带现象，觉得割胶了再跑回好看很多，额。我在想是不是DNA的量不够造成的~
赞一下 回复此楼
12楼2013-07-04 16:21:08
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

pandashu1988

铁虫 (初入文坛)
用的是2000的MARKER
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-03 20:16:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 02:57:59
我觉得你的问题很怪，电泳上样buffer和样品是要混合起来的，顺序只是方便操作的问题。一般都是先buffer，可以用一个枪头去吸，然后加入样品，因为枪头上带了样品，不能反复使用造成污染。没有缓冲液的样品孔里是空气，首先这对胶不好，容易干掉。其次，点样时如果在缓冲液里样品可以加在液体里会直接沉到样品孔的底部。所有的凝胶电泳都是这样做的。
至于你的电泳图，我觉得胶做得不行或者电泳条件有问题。marker都跑歪了，而且条带不清晰。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2013-07-03 23:39:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pandashu1988

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 23:39:15
我觉得你的问题很怪，电泳上样buffer和样品是要混合起来的，顺序只是方便操作的问题。一般都是先buffer，可以用一个枪头去吸，然后加入样品，因为枪头上带了样品，不能反复使用造成污染。没有缓冲液的样品孔里是空气 ...

嗯，多谢解答，嘿嘿~我还想问下，泡成这样看不清，是不是DNA总量也不够，切开了也看不清？
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-04 08:47:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭