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禅猫峰

木虫 (小有名气)

[求助] 求助:高效液相色谱问题

将我的样品进行高效液相色谱分析所含成分,使用的是凝胶柱,按分子量大小来分,理论上样品里面所含三种成分a、b、c,分子量大小a>b>c,且大小a、b间的差值与b、c间的差值大致一致,但我的出来的结果是a峰与b峰保留时间相差2min,而b峰与c峰仅相差是十几秒,a峰保留时间为17min左右,请问这结果正常吗?
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他山之石可以攻玉
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
禅猫峰: 金币+5, 有帮助 2013-07-09 17:25:53
楼主,你用的是凝胶柱,凝胶的原理是分子筛,它在确定比例的有机溶剂中溶胀的系数一定,这就表示它可以截留一定分子量的化合物,而小于此分子量的,都会通过,至于时间的间隔,可能就没有那么考究了。
3楼2013-07-03 16:50:29
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
高效液相分离原理是反相色谱,主要与极性有关系 和分子量没什么关系 挺正常的
Domyallbesttohaveahappylife.
2楼2013-07-03 15:40:04
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个结果应该是正常的,分子量的大小可能是主要原因,但化合物结构,溶剂的不同等多种原因可能所会有一定的影响,
4楼2013-07-04 07:29:27
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禅猫峰

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-07-03 16:50:29
楼主,你用的是凝胶柱,凝胶的原理是分子筛,它在确定比例的有机溶剂中溶胀的系数一定,这就表示它可以截留一定分子量的化合物,而小于此分子量的,都会通过,至于时间的间隔,可能就没有那么考究了。

那请问我用的同一个柱子,在不同的仪器上检测同一批样品,保留时间却发生的变化,比如标准品c,相差50s,这是为什么?也是正常的吗
他山之石可以攻玉
5楼2013-07-06 08:33:14
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