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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助：高效液相色谱问题
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禅猫峰

木虫 (小有名气)

[求助] 求助：高效液相色谱问题

将我的样品进行高效液相色谱分析所含成分，使用的是凝胶柱，按分子量大小来分，理论上样品里面所含三种成分a、b、c，分子量大小a>b>c,且大小a、b间的差值与b、c间的差值大致一致，但我的出来的结果是a峰与b峰保留时间相差2min，而b峰与c峰仅相差是十几秒，a峰保留时间为17min左右，请问这结果正常吗？
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他山之石可以攻玉
1楼 2013-07-03 15:14:34
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
禅猫峰: 金币+5, ★有帮助 2013-07-09 17:25:53
楼主，你用的是凝胶柱，凝胶的原理是分子筛，它在确定比例的有机溶剂中溶胀的系数一定，这就表示它可以截留一定分子量的化合物，而小于此分子量的，都会通过，至于时间的间隔，可能就没有那么考究了。
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3楼2013-07-03 16:50:29
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
高效液相分离原理是反相色谱，主要与极性有关系 和分子量没什么关系 挺正常的
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Domyallbesttohaveahappylife.
2楼2013-07-03 15:40:04
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个结果应该是正常的，分子量的大小可能是主要原因，但化合物结构，溶剂的不同等多种原因可能所会有一定的影响，
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4楼2013-07-04 07:29:27
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禅猫峰

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-07-03 16:50:29
楼主，你用的是凝胶柱，凝胶的原理是分子筛，它在确定比例的有机溶剂中溶胀的系数一定，这就表示它可以截留一定分子量的化合物，而小于此分子量的，都会通过，至于时间的间隔，可能就没有那么考究了。

那请问我用的同一个柱子，在不同的仪器上检测同一批样品，保留时间却发生的变化，比如标准品c，相差50s，这是为什么？也是正常的吗
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他山之石可以攻玉
5楼2013-07-06 08:33:14
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