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关于土壤酶活测定的问题
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最近测土壤脲酶活性，用的方法如下： 称取5g土样于50ml三角瓶中，加1ml甲苯，振荡均匀，15min后加10ml10%尿素溶液和20ml PH 6.7柠檬酸盐缓冲溶液，摇匀后在37℃恒温箱培养24小时。培养结束后过滤，过滤后取1ml滤液加入50ml容量瓶中，再加4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀。20min后显色，定容。1h内在分光光度计与578nm波长处比色。（靛酚的蓝色在1h内保持稳定）。 标准曲线制作：在测定样品吸光值之前，分别取0、1、3、5、7、9、11、13ml氮工作液，移于50ml容量瓶中，然后补加蒸馏水至20ml。再加入4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀。20min后显色，定容。1h内在分光光度计上于578nm波长处比色。然后以氮工作液浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。 注意事项: 1、每一个样品应该做一个无基质对照，以等体积的蒸馏水代替基质，其他操作与样品实验相同，以排除土样中原有的氨对实验结果的影响。 2、整个实验设置一个无土对照，不加土样，其他操作与样品实验相同，以检验试剂纯度和基质自身分解。 3、如果样品吸光值超过标曲的最大值，则应该增加分取倍数或减少培养的土样 四、结果计算： 以24小时后1g土壤中NH3－N的毫克数表示土壤脲酶活性（Ure）。 Ure=（a样品－a无土－a无基质）×V×n／m 式中：a样品为样品吸光值由标准曲线求得的NH3－N毫克数； a无土为无土对照吸光值由标准曲线求得的NH3－N毫克数； a无基质为无基质对照吸光值由标准曲线求得的NH3－N毫克数； V为显色液体积；n为分取倍数，浸出液体积／吸取滤液体积；m表示烘干土重 在最后的计算时，请问显色液的体积是多少？浸出液体积和吸取滤液体积又分别是多少呢？ |
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