应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE技术大虾请进
131/2返回列表12下一页
查看: 1327  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

胡小喜

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE技术大虾请进

最近做细菌DGGE，发现下半部分的条带老是分不开，好像亮带成一团了。请大虾们教教我怎么调整变性剂浓度，才能把条带分开。我是用40-55%的变性剂浓度，8%的聚丙烯酰胺胶，150v电泳5h。请大虾们帮我分析下，怎样调整能把条带分开的漂亮点，谢谢！
DGGE技术大虾请进
IMG_4676.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-26 00:16:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-28 19:46:07
胡小喜: 金币+3, ★有帮助 2013-07-01 18:45:29
调整梯度，60，另外，跑的时间增加到8小时看看。建议不用dgge做多样性了，发sci的话比较老了，要加定量估计还差不多。建议高通量

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2013-06-28 15:04:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

jkf881213

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你做T-RFLP分析也可以的。比DGGE要精确，而且便宜
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-28 21:14:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

TRFlp分析如果要确定条带信息的话也需要进行克隆测序，而且引物，基因组浓度，扩增条件对结果影响大，高通量是大趋势，看看近两年发表的文章就知道了，而且一个样本如果只做测序，不做分析也就1500左右。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

胡小喜
4楼2013-06-29 15:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你做什么环境微生物多样性？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-29 15:29:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡小喜

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by elbo at 2013-06-29 15:28:40
TRFlp分析如果要确定条带信息的话也需要进行克隆测序，而且引物，基因组浓度，扩增条件对结果影响大，高通量是大趋势，看看近两年发表的文章就知道了，而且一个样本如果只做测序，不做分析也就1500左右。
...

谢谢！高通量测序确实比较兴起，但我的样品提到的DNA量少，经过两轮扩增才能在琼脂糖上显示，不知道能不能拿去检测。高通量对DNA的质量和数目有没有特别要求呢
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-01 18:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡小喜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by elbo at 2013-06-29 15:29:57
请问你做什么环境微生物多样性？

做的发酵液里面的微生物
赞一下 回复此楼
7楼2013-07-01 18:50:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡小喜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jkf881213 at 2013-06-28 21:14:19
建议你做T-RFLP分析也可以的。比DGGE要精确，而且便宜

实验室没有DNA测序仪这种东西呢
赞一下 回复此楼
8楼2013-07-01 18:51:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡小喜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by elbo at 2013-06-28 15:04:31
调整梯度，60，另外，跑的时间增加到8小时看看。建议不用dgge做多样性了，发sci的话比较老了，要加定量估计还差不多。建议高通量

啊，生物技术确实更新很快，DGGE也过时了，我们实验室还在起始阶段啊，要加紧脚步了
赞一下 回复此楼
9楼2013-07-01 18:52:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elbo

金虫 (小有名气)
什么环境里面dna这么难提啊，传统方法应该没问题吧，另外可以考虑试剂盒。有点基因组DNA就可以的。高通量你送pcr产物可以的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
10楼2013-07-01 18:53:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 胡小喜 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭