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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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胡小喜

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE技术大虾请进

最近做细菌DGGE,发现下半部分的条带老是分不开,好像亮带成一团了。请大虾们教教我怎么调整变性剂浓度,才能把条带分开。我是用40-55%的变性剂浓度,8%的聚丙烯酰胺胶,150v电泳5h。请大虾们帮我分析下,怎样调整能把条带分开的漂亮点,谢谢!
DGGE技术大虾请进
IMG_4676.JPG
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

TRFlp分析如果要确定条带信息的话也需要进行克隆测序,而且引物,基因组浓度,扩增条件对结果影响大,高通量是大趋势,看看近两年发表的文章就知道了,而且一个样本如果只做测序,不做分析也就1500左右。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2013-06-29 15:28:40
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-28 19:46:07
胡小喜: 金币+3, 有帮助 2013-07-01 18:45:29
调整梯度,60,另外,跑的时间增加到8小时看看。建议不用dgge做多样性了,发sci的话比较老了,要加定量估计还差不多。建议高通量

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-06-28 15:04:31
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jkf881213

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你做T-RFLP分析也可以的。比DGGE要精确,而且便宜
3楼2013-06-28 21:14:19
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你做什么环境微生物多样性?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-06-29 15:29:57
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