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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 代谢产物的寻找
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紫鸳

新虫 (小有名气)

[求助] 代谢产物的寻找

求助~~我想请问一下怎样开展寻找药物代谢产物的实验？其基本思路是怎样的？
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1楼 2013-06-25 09:42:55
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haoruijia8

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+1, 3u 2013-06-25 12:25:38
首先根据你自己的代谢知识，找出可能的代谢位点，推出可能的代谢产物，然后可以直接进行动物实验，也可以现在体外模拟代谢过程，然后做实验确证有哪些代谢产物就可以了
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2楼2013-06-25 11:18:10
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waitgirl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

设定空白对照组和给药组，二者经lc-ms/ms采集数据。获得二者对比数据，给药组比空白组中多出的色谱峰有可能为代谢物（去除原型），waters的质谱仪可以利用metabolynx软件进行代谢产物寻找。最好能够总结I和II相代谢反应的加合基团，及精确质量数，从而确证代谢产物结构。
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3楼2013-07-01 13:31:18
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wangwang1989

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

就是寻找，寻找就要分离，分离就要打核磁确定结构。方法就是用分析柱摸好条件，分别进一针空白的和给药的。重复两三次，确定给药的有峰的，而空白的同一时间没有出峰。那么肯定就是代谢产物，然后用半制备柱放大进样量，大概100ul左右，浓度尽可能浓一点，峰能分开就好。然后就慢慢制备吧，够打谱的时候去打谱确定结构就行
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我有一个梦想，我想当校长
4楼2013-07-01 13:43:56
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airhblue11

银虫 (小有名气)
一般的话要用到LC-MS/MS，首先是样品的获得，可以是血浆、尿液、粪便、胆汁等等，
处理后进行LC-MS/MS检测，与空白样品比对，可以获取一些差异峰，
然后使用相应的处理软件（应该是与质谱系统配套的）找代谢产物：一般的步骤是：根据精确分子量判断代谢产物的类型，即发生了哪类代谢反应，包括I相和II相，之后可以进行确证：如通过制备的方法获得目标代谢产物或采用多级质谱判断裂解规律来确定
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5楼2013-07-01 13:56:04
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紫鸳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by waitgirl at 2013-07-01 13:31:18
设定空白对照组和给药组，二者经lc-ms/ms采集数据。获得二者对比数据，给药组比空白组中多出的色谱峰有可能为代谢物（去除原型），waters的质谱仪可以利用metabolynx软件进行代谢产物寻找。最好能够总结I和II相代谢 ...

嗯嗯，可是我的中间代谢产物不稳定，含量比较低。。。我想请问一下你用的也是waters质谱仪嚒？
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6楼2013-08-22 16:40:57
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紫鸳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangwang1989 at 2013-07-01 13:43:56
就是寻找，寻找就要分离，分离就要打核磁确定结构。方法就是用分析柱摸好条件，分别进一针空白的和给药的。重复两三次，确定给药的有峰的，而空白的同一时间没有出峰。那么肯定就是代谢产物，然后用半制备柱放大进样 ...

嗯嗯 O(∩_∩)O谢谢
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7楼2013-08-22 16:41:31
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紫鸳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by airhblue11 at 2013-07-01 13:56:04
一般的话要用到LC-MS/MS，首先是样品的获得，可以是血浆、尿液、粪便、胆汁等等，
处理后进行LC-MS/MS检测，与空白样品比对，可以获取一些差异峰，
然后使用相应的处理软件（应该是与质谱系统配套的）找代谢产物： ...

嗯嗯 谢谢你的指导！
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8楼2013-08-22 16:42:36
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紫鸳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by haoruijia8 at 2013-06-25 11:18:10
首先根据你自己的代谢知识，找出可能的代谢位点，推出可能的代谢产物，然后可以直接进行动物实验，也可以现在体外模拟代谢过程，然后做实验确证有哪些代谢产物就可以了

现在我不打算做动物实验了，直接拿生物样品鉴定。。
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9楼2013-08-22 16:43:23
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