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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎么判定沉淀是不是蛋白质？
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creepon

铁虫 (小有名气)

[求助] 怎么判定沉淀是不是蛋白质？

我在微通道内做一些酶反应。发现通道内多了些一团沉淀，因为通道小，沉淀比较大，所以卡在里面。我试过用油、乙醇、水、2%SDS水，乙腈去冲洗，都不会溶解。

我初步怀疑是酶变性沉淀出来。所以我请教大家两个问题

1.有什么办法可以把沉淀出来的蛋白质都溶解掉？
2.或者有什么办法判定沉淀出来的是不是蛋白质？用SDS和乙腈都溶解不掉，是不是说明沉淀出来的不是酶？
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1楼 2013-06-23 13:17:16
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以试试尿素或者盐酸胍吗？
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2楼2013-06-23 15:09:10
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creepon

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-06-23 15:09:10
可以试试尿素或者盐酸胍吗？

你的意思是尿素会溶解变性的蛋白质吗？

是不是能溶解说明沉淀是蛋白质，不能就说明是其他杂质？
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3楼2013-06-23 17:26:53
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
creepon(myprayer代发): 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 20:01:05
我觉得，要是蛋白质的沉淀的话，用高浓度尿素或者盐酸胍是可以洗掉的，要是再洗不掉的话配合超声，就能洗干净。至于是否确证是蛋白，我也不清楚。我也不知道这样的洗涤方式会不会对你通道有影响。
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4楼2013-06-23 17:59:20
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creepon

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-06-23 17:59:20
我觉得，要是蛋白质的沉淀的话，用高浓度尿素或者盐酸胍是可以洗掉的，要是再洗不掉的话配合超声，就能洗干净。至于是否确证是蛋白，我也不清楚。我也不知道这样的洗涤方式会不会对你通道有影响。

好的，非常感谢
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5楼2013-06-23 20:26:06
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