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[求助]
T4酶切连接求助!
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最近在做酶切连接,我用的载体上的多克隆位点,SALI和HIND3酶切切开之后与目的片段连接,目的片段也是用同样的酶从T载上切下来的,载体和片段都做了胶回收也跑过胶看过亮度了,浓度还可以的,然后按1比10体系加,T4连接过夜。我做了好久了平板上一点也不长。确认酶什么的都是没有问题的别人做都很正常,感受态我也换过几次也不长,用商业化的感受态也不长,平板抗生素也都是没有问题的。现在抓狂了,到底问题出在哪里都不知道,求大神解答!谢谢!!! [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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