24小时热门版块排行榜    

查看: 1171  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

晨青小虫

铜虫 (初入文坛)

[求助] ELISA检测猪肉中的酪胺,怎样充分除脂?

我是做ELISA的,主要检测新鲜肉及肉制品中的酪胺,目前需要做实际样品了。发现基质影响很难消除,(我是把1g肉用3ml甲醇做提取液,漩涡振荡10分钟,重复提两次。合并上清液,正己烷除脂多次,弃去上层正己烷层,但是氮吹后用10mlPBS复溶后发现混浊,像是有脂肪,离心取上清,将样品稀释液稀释到50倍,加入0.5%BSA掩蔽剂,作板,发现样品稀释液的control才0.6,不能与标曲重合。)
    用甲醇做提取液是考虑到标品的溶解性问题,因为酪胺不溶于氯仿、不溶于乙酸乙酯等溶剂。而样品稀释50倍也是达到稀释上限了,再稀释的话检测实际样品的灵敏度就很低了。
    正己烷、乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂哪个除脂效果好?有哪位高人能指导我一下除脂的好方法,以消除基质影响,不胜感激!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晨青小虫 at 2013-06-20 10:13:50
很感谢您的回复~~~
我想问一下,脂肪是更易溶于甲醇呢,还是氯仿呢?氯仿甲醇的比例有要求吗?(甲醇和正己烷不互溶,而氯仿和甲醇互溶,氯仿比正己烷除脂更好吗?)...

一般采用氯仿:甲醇2:1

因为要形成氯仿,甲醇和水的体系,使脂肪充分溶解于氯仿中
走的太远,别忘了为何出发
5楼2013-06-20 11:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
氯仿甲醇混合液除脂,然后加水,稍加水,酪胺在上层甲醇水中。
走的太远,别忘了为何出发
2楼2013-06-17 19:56:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zybpxy at 2013-06-17 19:56:42
氯仿甲醇混合液除脂,然后加水,稍加水,酪胺在上层甲醇水中。

补充一下,脂肪在氯仿中
走的太远,别忘了为何出发
3楼2013-06-17 19:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晨青小虫

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zybpxy at 2013-06-17 19:57:45
补充一下,脂肪在氯仿中...

很感谢您的回复~~~
我想问一下,脂肪是更易溶于甲醇呢,还是氯仿呢?氯仿甲醇的比例有要求吗?(甲醇和正己烷不互溶,而氯仿和甲醇互溶,氯仿比正己烷除脂更好吗?)
4楼2013-06-20 10:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂(0805) +3 烟汐忆海 2026-03-16 7/350 2026-03-17 20:16 by peike
[考研] 材料专硕306英一数二 +7 z1z2z3879 2026-03-16 9/450 2026-03-17 17:31 by ccjequ
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么! 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见