24小时热门版块排行榜    

查看: 1174  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

晨青小虫

铜虫 (初入文坛)

[求助] ELISA检测猪肉中的酪胺,怎样充分除脂?

我是做ELISA的,主要检测新鲜肉及肉制品中的酪胺,目前需要做实际样品了。发现基质影响很难消除,(我是把1g肉用3ml甲醇做提取液,漩涡振荡10分钟,重复提两次。合并上清液,正己烷除脂多次,弃去上层正己烷层,但是氮吹后用10mlPBS复溶后发现混浊,像是有脂肪,离心取上清,将样品稀释液稀释到50倍,加入0.5%BSA掩蔽剂,作板,发现样品稀释液的control才0.6,不能与标曲重合。)
    用甲醇做提取液是考虑到标品的溶解性问题,因为酪胺不溶于氯仿、不溶于乙酸乙酯等溶剂。而样品稀释50倍也是达到稀释上限了,再稀释的话检测实际样品的灵敏度就很低了。
    正己烷、乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂哪个除脂效果好?有哪位高人能指导我一下除脂的好方法,以消除基质影响,不胜感激!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晨青小虫 at 2013-06-20 10:13:50
很感谢您的回复~~~
我想问一下,脂肪是更易溶于甲醇呢,还是氯仿呢?氯仿甲醇的比例有要求吗?(甲醇和正己烷不互溶,而氯仿和甲醇互溶,氯仿比正己烷除脂更好吗?)...

一般采用氯仿:甲醇2:1

因为要形成氯仿,甲醇和水的体系,使脂肪充分溶解于氯仿中
走的太远,别忘了为何出发
5楼2013-06-20 11:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
氯仿甲醇混合液除脂,然后加水,稍加水,酪胺在上层甲醇水中。
走的太远,别忘了为何出发
2楼2013-06-17 19:56:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zybpxy at 2013-06-17 19:56:42
氯仿甲醇混合液除脂,然后加水,稍加水,酪胺在上层甲醇水中。

补充一下,脂肪在氯仿中
走的太远,别忘了为何出发
3楼2013-06-17 19:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晨青小虫

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zybpxy at 2013-06-17 19:57:45
补充一下,脂肪在氯仿中...

很感谢您的回复~~~
我想问一下,脂肪是更易溶于甲醇呢,还是氯仿呢?氯仿甲醇的比例有要求吗?(甲醇和正己烷不互溶,而氯仿和甲醇互溶,氯仿比正己烷除脂更好吗?)
4楼2013-06-20 10:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +5 吃吃吃才有意义 2026-03-19 5/250 2026-03-19 16:18 by 30660438
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[教师之家] 焦虑 +9 水冰月月野兔 2026-03-13 13/650 2026-03-19 09:50 by otani
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
请填处理意见