24小时热门版块排行榜    

查看: 1167  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

晨青小虫

铜虫 (初入文坛)

[求助] ELISA检测猪肉中的酪胺,怎样充分除脂?

我是做ELISA的,主要检测新鲜肉及肉制品中的酪胺,目前需要做实际样品了。发现基质影响很难消除,(我是把1g肉用3ml甲醇做提取液,漩涡振荡10分钟,重复提两次。合并上清液,正己烷除脂多次,弃去上层正己烷层,但是氮吹后用10mlPBS复溶后发现混浊,像是有脂肪,离心取上清,将样品稀释液稀释到50倍,加入0.5%BSA掩蔽剂,作板,发现样品稀释液的control才0.6,不能与标曲重合。)
    用甲醇做提取液是考虑到标品的溶解性问题,因为酪胺不溶于氯仿、不溶于乙酸乙酯等溶剂。而样品稀释50倍也是达到稀释上限了,再稀释的话检测实际样品的灵敏度就很低了。
    正己烷、乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂哪个除脂效果好?有哪位高人能指导我一下除脂的好方法,以消除基质影响,不胜感激!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zybpxy at 2013-06-17 19:56:42
氯仿甲醇混合液除脂,然后加水,稍加水,酪胺在上层甲醇水中。

补充一下,脂肪在氯仿中
走的太远,别忘了为何出发
3楼2013-06-17 19:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
氯仿甲醇混合液除脂,然后加水,稍加水,酪胺在上层甲醇水中。
走的太远,别忘了为何出发
2楼2013-06-17 19:56:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晨青小虫

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zybpxy at 2013-06-17 19:57:45
补充一下,脂肪在氯仿中...

很感谢您的回复~~~
我想问一下,脂肪是更易溶于甲醇呢,还是氯仿呢?氯仿甲醇的比例有要求吗?(甲醇和正己烷不互溶,而氯仿和甲醇互溶,氯仿比正己烷除脂更好吗?)
4楼2013-06-20 10:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晨青小虫 at 2013-06-20 10:13:50
很感谢您的回复~~~
我想问一下,脂肪是更易溶于甲醇呢,还是氯仿呢?氯仿甲醇的比例有要求吗?(甲醇和正己烷不互溶,而氯仿和甲醇互溶,氯仿比正己烷除脂更好吗?)...

一般采用氯仿:甲醇2:1

因为要形成氯仿,甲醇和水的体系,使脂肪充分溶解于氯仿中
走的太远,别忘了为何出发
5楼2013-06-20 11:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 293求调剂 +5 zjl的号 2026-03-16 6/300 2026-03-17 10:13 by zhyzzh
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 341求调剂 +5 捣蛋猪猪 2026-03-11 5/250 2026-03-17 06:56 by Muziwl
[考研] 材料专硕326求调剂 +5 墨煜姒莘 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:30 by 木瓜膏
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 工科,求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
信息提示
请填处理意见