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lindaliu8288银虫 (小有名气)
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[求助]
果胶的测定和果胶甲氧基含量的测定
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各位，请帮忙下，果胶的总含量和甲氧基含量有谁测定过啊，我看文献，不同的人的描述方法都有不一样，到底要怎么测，你们测过的给我个方法，谢谢了啊，我看得头大，晕乎乎的。以下的测定方法可以用吗？？？？？？？？？？ 甲氧基测定：1、 准确称取0.500g高甲氧基果胶于烧杯中，加入一定量的混合试剂，搅拌10min，移入砂芯漏斗中，用混合试剂洗涤，每次15ml左右，续以60%异丙醇洗涤样品，至滤液不含氯化物（可用硝酸盐溶液检验）为止，最后用20ml60%异丙醇洗涤，移入105℃烘箱中干燥1h，冷却后称重。 2、 称取1/10经冷却的样品，移入250ml锥形瓶中，用2ml乙醇润湿，加入100ml不含CO2的水，用瓶塞塞紧，不断地转动，使样品全部溶解，加入2滴酚酞指示剂，用0.02mol/L氢氧化钠标准溶液滴定，记录所消耗氢氧化钠的体积（V），即为原始滴定度。 3、 继续加入20.00ml0.5mol/L的氢氧化钠标准溶液，加塞后强烈振摇15min，加入等摩尔的0.5mol/L的盐酸标准溶液，充分振摇。然后加入3d酚酞指示剂，用0.02mol/L氢氧化钠溶液滴定至微红色，记录所消耗的氢氧化钠的体积（V2），即为皂化滴定度。 4、 计算：高甲氧基果胶的酯化度（%）= V2/（V1+V2）Ⅹ100% 式中V1——样品溶液的原始滴定度（ml） V2——样品溶液的原始滴定度（ml） 果胶总含量测定：A、提取果胶 同重量法。原料→热乙醇回流钝化酶、去杂→提取（酸解提取总果胶或热水提取水溶性果胶）→果胶提取液、定容。 B、标准曲线的制作 取8支50mL比色管，各加入12mL浓硫酸，置冰浴中，边冷动边缓慢地依次加入浓度为0、10、20、30、40、50、60、70 μg/mL的半乳糖醛酸溶液2 mL，充分混合后，再置冰浴中冷却。然后在沸水浴中准确加热10 min，用流水速冷至室温，各加入0.15%咔唑试剂1mL，充分混合，置室温下放置30min，以0号管为空白在530nm波长下测定吸光度，绘制标准工作曲线。 C、样品果胶含量的测定 取果胶提取液，用水稀释到适当浓度（在标准曲线浓度范围内）。取2mL稀释液于50mL比色管中，按标准曲线制作方法操作，测定吸光度。对照标准曲线，求出稀释的果胶提取液中半乳糖醛酸含量（C μg/mL）。 D、结果计算 式中：C—对照标准曲线求得的果胶提取稀释液的果胶含量（μg/mL）； V—果胶提取液原液体积（mL）； K—果胶提取液稀释倍数； W—样品质量（g）； 106—质量单位换算系数。 [ Last edited by zybpxy on 2013-6-7 at 09:24 ] |
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