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张林岩

木虫 (小有名气)

[求助] a-葡萄糖苷酶活性测定

各路大侠,多指教!!!
测化合物对a-葡萄糖苷酶的活性,以PNPG为底物,阿卡波糖为阳性对照。操作流程:空白组 磷酸钾缓冲液20ul,加入酶20ul,37度恒温10min,加入20ulPNPG,37度恒温10min,加入碳酸盐终止反应,405nm测A。为什么没有吸收?96孔板也没有什么颜色变化,这是什么原因啊?
请大家帮忙分析分析原因?
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sunnyxue

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
张林岩: 金币+5, 有帮助 2013-06-05 09:24:10
第二次孵育时间较短吧,很可能与PNPG的浓度有关系,我做的时候,一般都是颜色深,没有不出的现象
2楼2013-06-04 21:26:18
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新医大梁乐

新虫 (初入文坛)

用生物自显影技术筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的试验显色剂是什么?
3楼2013-06-05 13:43:37
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liyaya133

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyxue at 2013-06-04 21:26:18
第二次孵育时间较短吧,很可能与PNPG的浓度有关系,我做的时候,一般都是颜色深,没有不出的现象

请问你pNPG的浓度是多少

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-06-05 12:41:45
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张林岩

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liyaya133 at 2014-06-05 12:41:45
请问你pNPG的浓度是多少
...

5mM
5楼2014-06-08 06:53:55
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木棉波波

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 张林岩 at 2014-06-08 06:53:55
5mM

请问能分享下你的步骤么,我做的也是没颜色出现
6楼2015-08-25 19:08:21
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Saran_1206

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyxue at 2013-06-04 21:26:18
第二次孵育时间较短吧,很可能与PNPG的浓度有关系,我做的时候,一般都是颜色深,没有不出的现象

你好,我也是做的颜色比较深,请问找到解决办法了吗?你的反应体系可以参考吗?
7楼2015-11-18 17:25:24
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