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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » a-葡萄糖苷酶活性测定
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张林岩

木虫 (小有名气)

[求助] a-葡萄糖苷酶活性测定

各路大侠，多指教！！！
测化合物对a-葡萄糖苷酶的活性，以PNPG为底物，阿卡波糖为阳性对照。操作流程：空白组 磷酸钾缓冲液20ul，加入酶20ul，37度恒温10min，加入20ulPNPG，37度恒温10min，加入碳酸盐终止反应，405nm测A。为什么没有吸收？96孔板也没有什么颜色变化，这是什么原因啊？
请大家帮忙分析分析原因？
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1楼 2013-06-01 20:39:03
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sunnyxue

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
张林岩: 金币+5, ★有帮助 2013-06-05 09:24:10
第二次孵育时间较短吧，很可能与PNPG的浓度有关系，我做的时候，一般都是颜色深，没有不出的现象
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2楼2013-06-04 21:26:18
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新医大梁乐

新虫 (初入文坛)
用生物自显影技术筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的试验显色剂是什么？
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3楼2013-06-05 13:43:37
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liyaya133

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyxue at 2013-06-04 21:26:18
第二次孵育时间较短吧，很可能与PNPG的浓度有关系，我做的时候，一般都是颜色深，没有不出的现象

请问你pNPG的浓度是多少

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-06-05 12:41:45
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张林岩

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liyaya133 at 2014-06-05 12:41:45
请问你pNPG的浓度是多少
...

5mM
5楼2014-06-08 06:53:55
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木棉波波

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 张林岩 at 2014-06-08 06:53:55
5mM

请问能分享下你的步骤么，我做的也是没颜色出现
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6楼2015-08-25 19:08:21
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Saran_1206

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyxue at 2013-06-04 21:26:18
第二次孵育时间较短吧，很可能与PNPG的浓度有关系，我做的时候，一般都是颜色深，没有不出的现象

你好，我也是做的颜色比较深，请问找到解决办法了吗？你的反应体系可以参考吗？
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7楼2015-11-18 17:25:24
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