应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR堵孔堵死我了~妈妈的~~~
61/1返回列表
查看: 1921  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

开始2012

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR堵孔堵死我了~妈妈的~~~

最近做PCR，模板为8Kbp左右质粒，PCR目的条带为5Kbp，电泳使用1%的胶。做了好几次，每次都堵孔求高手指教原因最近运气很背啊
回复此楼

» 猜你喜欢
那些还飞翔着，不可思议的梦！
1楼 2013-05-30 18:41:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
开始2012(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-31 10:48:15
5Kbp的目的条带,用1%的胶,你就不能用小一点的吗???


琼脂糖凝胶浓度（%）        线状DNA分子分离范围（kb）
0.3        5--60
0.6        1--20
0.9        0.5--7
1.2        0.4--6
1.5        0.2--3
2.0        0.1—2
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-05-30 19:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanfang2012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
开始2012(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-31 10:48:28
不太明白你的说的堵孔是什么情况，如果是胶浓度大的话，最多跑的慢，我开始做的时候有好多次都是跑完之后发现只在加样孔有亮光，不知道你说的是不是这种情况
赞一下 回复此楼
believe yourself！
3楼2013-05-31 09:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lf6220

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by yanfang2012 at 2013-05-31 09:51:16
不太明白你的说的堵孔是什么情况，如果是胶浓度大的话，最多跑的慢，我开始做的时候有好多次都是跑完之后发现只在加样孔有亮光，不知道你说的是不是这种情况

不知道你的上样多少，你可以降低上样量看看，1%的胶是没有问题的
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-31 14:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
开始2012(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:17:23
切胶回收时，胶要切得尽可能小，减少非必要胶块，按说明书所述加适量溶胶液，待溶胶完全后，上回收吸附柱，一般没有问题，如果堵孔，可分两个吸附柱上柱
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-31 21:00:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的样品应该是有问题吧！堵孔，就是电泳不能跑进胶里那种情况，感觉是不是你的成分有什么问题，导致跑不进！
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-01 23:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 开始2012 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-31 01:37 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-31 00:56 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 15/750 2026-08-31 00:10 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 7/350 2026-08-30 19:45 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:35 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:34 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:01 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:28 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 17:03 by hZiFeudZyoGR
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭