应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR堵孔堵死我了~妈妈的~~~
61/1返回列表
查看: 1928  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

开始2012

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR堵孔堵死我了~妈妈的~~~

最近做PCR，模板为8Kbp左右质粒，PCR目的条带为5Kbp，电泳使用1%的胶。做了好几次，每次都堵孔求高手指教原因最近运气很背啊
回复此楼

» 猜你喜欢
那些还飞翔着，不可思议的梦！
1楼 2013-05-30 18:41:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
开始2012(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-31 10:48:15
5Kbp的目的条带,用1%的胶,你就不能用小一点的吗???


琼脂糖凝胶浓度（%）        线状DNA分子分离范围（kb）
0.3        5--60
0.6        1--20
0.9        0.5--7
1.2        0.4--6
1.5        0.2--3
2.0        0.1—2
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-05-30 19:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanfang2012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
开始2012(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-31 10:48:28
不太明白你的说的堵孔是什么情况，如果是胶浓度大的话，最多跑的慢，我开始做的时候有好多次都是跑完之后发现只在加样孔有亮光，不知道你说的是不是这种情况
赞一下 回复此楼
believe yourself！
3楼2013-05-31 09:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lf6220

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by yanfang2012 at 2013-05-31 09:51:16
不太明白你的说的堵孔是什么情况，如果是胶浓度大的话，最多跑的慢，我开始做的时候有好多次都是跑完之后发现只在加样孔有亮光，不知道你说的是不是这种情况

不知道你的上样多少，你可以降低上样量看看，1%的胶是没有问题的
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-31 14:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
开始2012(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:17:23
切胶回收时，胶要切得尽可能小，减少非必要胶块，按说明书所述加适量溶胶液，待溶胶完全后，上回收吸附柱，一般没有问题，如果堵孔，可分两个吸附柱上柱
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-31 21:00:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的样品应该是有问题吧！堵孔，就是电泳不能跑进胶里那种情况，感觉是不是你的成分有什么问题，导致跑不进！
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-01 23:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 开始2012 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:46 by xiangy672
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +6 349506619 2026-08-28 6/300 2026-08-31 08:43 by kingkocxr
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭