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weiyixing

金虫 (小有名气)

[求助] 体外蛋白消化率

我想请教一下,做胃蛋白酶和胰蛋白酶消化蛋白时,酶的添加量是多少,我的酶是粉状的,做了一次感觉消化率比文献上低好多,我当时是按酶活U/mL加进酶解液里的。
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雨梦无声

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酶最好要溶,而不是直接加粉,像胃蛋白酶你可以用pH=4左右的醋酸铵缓冲溶液溶(酶你要考虑酸度,整个酶解体系的酸度也会影响你的酶活性表现)
2楼2013-05-29 18:18:23
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小蒋

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胃蛋白酶的最适pH=1.6~1.8,在37℃下酶解,用3mol/L盐酸调节pH值,保证在酶解过程中pH保证在1.6~1.8内,胰蛋白酶液最适在7.2左右,在37℃下酶解过程中保持酶解pH为7.2左右,或用相应 PBS 缓冲液保持pH值,进行酶解,具体浓度,你还是依据相关文献配置,事先用 PBS 缓冲液配置成溶液比较好,用前预热10min
我想我会的。
3楼2013-05-30 09:16:45
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