应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】微卫星多态性检测maker条带如何优化
51/1返回列表
查看: 887  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

平凡却最重要

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助/交流】微卫星多态性检测maker条带如何优化

聚丙烯酰胺电泳检测的微卫星多态性，结果如图：maker一直有不同程度的拖尾或者条带过粗和模糊，影响我判读序列长度，想把maker条带做的更清晰，不知道该从什么地方改进？
【求助/交流】微卫星多态性检测maker条带如何优化


【求助/交流】微卫星多态性检测maker条带如何优化-1
IMG_20130517_105616.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-28 14:34:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

平凡却最重要

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by siyuewuyv at 2013-06-20 20:48:22
由于我做的是群体遗传，所以要知道每个个体微卫星的基因型，由于常规的跑胶读不出来，所以要用毛细管电泳进行分型，对PCR产物的要求比较高。
    但我PCR产物用PAGE跑胶发现杂带较多，通过改变退火温度和T-D PCR都 ...

是荧光标记的毛细管检测么？模板不纯或者有降解出现杂带是很可能的。模板质量不高是指亮度方面还是有降解呢？还有基因型普通page也可以跑呀，效果好一点跑变性胶，不过确实麻烦了点。
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-25 15:04:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

siyuewuyv

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-20 22:11:27
1949stone: MolEPI+1, good 2013-06-21 08:37:39
楼主的胶品相实在不敢恭维。做胶的时候玻璃板要封好，这样点样孔才不会缩进去。楼主的胶下面怎么不齐啊，是后来切的吗？如果不是，那胶要做规整一点，条带才不会弯弯曲曲。还有电泳时缓冲液要多一点，太少的话液面不平，电场分布不均匀就会造成整体条带“微笑”。你的MAKER拖尾，可能是因为上样量太大或电泳电压过高。还有银染染色时显色液加甲醛能让胶的背景色变弱便于观察。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-20 20:45:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

siyuewuyv

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-20 22:11:36
1949stone: 金币+2, 鼓励多多交流 我也做过这个 很有感触啊 2013-06-21 08:38:06
由于我做的是群体遗传，所以要知道每个个体微卫星的基因型，由于常规的跑胶读不出来，所以要用毛细管电泳进行分型，对PCR产物的要求比较高。
    但我PCR产物用PAGE跑胶发现杂带较多，通过改变退火温度和T-D PCR都不能有效的减少杂带。请问有什么好的建议？
（PS：我做PCR用的是天根的 2*Taq PCR Master Mix , 10ul体系，引物0.5+0.5 ,模板1.  我的模板质量确实不是太高，这会是主要原因吗？）
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-20 20:48:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

平凡却最重要

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by siyuewuyv at 2013-06-20 20:45:06
楼主的胶品相实在不敢恭维。做胶的时候玻璃板要封好，这样点样孔才不会缩进去。楼主的胶下面怎么不齐啊，是后来切的吗？如果不是，那胶要做规整一点，条带才不会弯弯曲曲。还有电泳时缓冲液要多一点，太少的话液面不 ...

感谢解答。。追问：我最后是直接测序检测的微卫星，关于这样做，我只找到中文的引证，直接测序检测微卫星到底可不可行，希望能找到sci的引证
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-25 15:13:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然评审意见 +9 wangmingqi 2026-08-28 10/500 2026-08-28 21:28 by Robin_BE
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 17:09 by winsaint
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭