| 查看: 2331 | 回复: 5 | ||||
[求助]
求教武汉大学的同志 关于水稻花粉RNA的提取
|
关于水稻花粉RNA的提取 听说取花粉是穿着军大衣在-40度冰箱里！真的是这样吗？ 花粉量如此之少取得急死人 还请赐教如此少材料的RNA如何提取 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 我的实验 |
» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有255人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有8人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有10人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 水稻收获之后还可以取其叶片提取RNA吗
已经有7人回复
志子
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 2847 (讲师)
- 贵宾: 0.743
- 金币: 42456.9
- 散金: 3857
- 红花: 299
- 帖子: 21362
- 在线: 1136.8小时
- 虫号: 2471022
- 注册: 2013-05-19
- 专业: 高分子组装与超分子结构
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
1.水稻单核花粉分离： 筛选好的材料剪成3~4cm长的小段，加入15%蔗糖溶液，组织破碎机打碎，依次通过150、50、30微米滤膜，15%蔗糖溶液冲洗30微米滤膜，收集膜上花粉，密度梯度离心，1000rpm 10min。吸取特点界面处花粉，2500rpm，4℃离心5min收集沉淀。 2.水稻二核花粉分离： 筛选好的花药加入15%蔗糖溶液，玻璃棒轻捣让花粉散出，依次通过50、30微米滤膜，15%蔗糖溶液冲洗微米滤膜，收集膜上花粉，密度梯度离心，1000rpm 10min。吸取特点界面处花粉，2000rpm，4℃离心5min收集沉淀。 3.水稻三核花粉分离： 筛选好的花药加入45%蔗糖溶液，玻璃棒轻捣让花粉散出，依次通过60、35微米滤膜，45%蔗糖溶液冲洗微米滤膜，收集膜上花粉，直接2500rpm，4℃离心5min收集沉淀。 4.镜检： lei HC显微镜观测分离好的各期花粉大小、花粉壁、细胞内含物和杂质。含0.1% Triton的DAPI染色观察细胞核，FDA染色观察细胞活力。 5.RNA提取： 分离得到的花粉用RNeasy Plant Mini Kit提取RNA，琼脂糖凝胶电泳检测提取的RNA。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
亚先2楼2013-05-29 01:23:26
非常感谢 3楼2013-05-29 11:17:38
4楼2013-06-06 11:07:05
5楼2013-06-08 13:14:39
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
亚先: 金币+7, ★有帮助 2013-08-24 13:25:15
亚先: 金币+7, ★有帮助 2013-08-24 13:25:15
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2013-08-05 11:05:43
5