应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 90bp小片段的回收
52/1返回列表
查看: 2106  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

damo8912

铜虫 (初入文坛)

[求助] 90bp小片段的回收

90bp的片段胶回收检测什么也没有。回收试剂盒上写着小于400bp的加等凝胶体积的异丙醇，加异丙醇后明显能看到有沉淀析出，想问一下加异丙醇的作用是什么，还有那个沉淀是什么，还有回收这样的小片段有什么好的方法呢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2013-05-25 14:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damo8912

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 植物科研男 at 2013-05-26 12:05:30
你用的是qigen的试剂盒吧。它最小的能回收100bp的条带，再小的话就直接从膜上离心下去了，所以得率非常低。它增对超小片段和超大片段还有两外一个kit，可以用那个试试。

用的AXYGEN的
回复此楼
11楼2013-05-26 18:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
damo8912(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:21:49
离心之后将收集管中的溶液重新加入吸附柱中再次离心，以增加得率。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-05-25 16:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damo8912

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hlwnxfd2011 at 2013-05-25 16:08:23
离心之后将收集管中的溶液重新加入吸附柱中再次离心，以增加得率。

恩 谢谢 我有这样做 水浴5min离心重吸再水浴5min离心
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-25 22:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anygene_seq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:00
加入异丙醇就是为了沉淀析出，沉淀就是DNA，所有DNA都是不溶于异丙醇。建议你加入异丙醇，混匀后放入-20度静置30min，然后12000冷冻离心10min，去掉上清，用少量溶胶液洗涤管壁DNA，再反复过柱2次。应该能回收到，一般的胶回收柱对于小片段回收率都很低的。你还可以用桥式PCR试试，测序公司一般都是这样做的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-05-25 22:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭