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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)

[求助] 求解读此PCR 为何如此不堪入目

求解读此PCR 为何如此不堪入目
求解读此PCR 为何如此不堪入目
2013-5-23晚上PCR1.JPG
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平静的水和不叫的狗是最可怕的
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阿树的秋天

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-05-25 08:57:06
太笼统了  PCR有很多限制因素 如退火温度 延伸时间 以及楼上诸位兄弟姐妹说的浓度 另外还有引物特异性的问题  电泳缓冲液有问题也会导致这些问题 一个个找吧
6楼2013-05-24 09:44:40
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-05-24 07:35:21
多半是反应体系里面模板的浓度太高了.
2楼2013-05-23 23:04:30
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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-23 23:04:30
多半是反应体系里面模板的浓度太高了.

前面五个是1ul 后面五个是0.5ul的模板量  我觉得不是很多  有没有那种情况就是根本没有模板DNA呢?
平静的水和不叫的狗是最可怕的
3楼2013-05-23 23:54:23
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不像. 你不能凭体积判断模板是不是加多了, 需要考虑的是最终在PCR反应体系里面模板浓度.
4楼2013-05-24 00:09:32
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