24小时热门版块排行榜

返回列表

云中鸿雁

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 324.1
帖子: 18
在线: 7.2小时
虫号: 2187361
注册: 2012-12-15
专业: 环境微生物学

[求助] 求助 SSCP染色方法

我要做SSCP，发现染色的方法有很多，比如1）1．固定。把胶卸下，做好起始记号，放入70%乙醇中在摇床上固定15min。固定好后乙醇回收（可以重复使用5次左右），蒸馏水洗两遍，每遍3min左右。若同时染两块胶固定和洗脱都要适当增加时间。
2．染色。染色液（200ml染色液含3.6%的NaOH4.2ml、20%AgNO33.6ml、氨水2ml）染色30min，同时染两块胶要适当增加时间，需40min左右。倒掉染色液，洗3遍，每遍3min，同时染两块胶要适当增加时间。
3．显色。显色液（200ml显色也包含1%柠檬酸钠1ml，甲醛100ul）至清晰。倒掉显色液，加蒸馏洗脱3次停显。
2）. 固定  采用10%乙酸进行固定。取450ml存水，加入冰醋酸50ml混合，倒入容器中放在摇床上固定30min；水洗三次，每次2min；
2. 染色  采用0.1%硝酸银染色，取0.4g硝酸银加入到400ml存水中，再加入甲醛500μl，轻摇25min（用黑布盖好）；水洗20s；
3. 显色  25%碳酸钠，取12.5g碳酸钠加入500ml纯水中(-20°冷却的)，加入甲醛500μl，Na2S2O3100μl(100mg/mL)；
4. 固定  10%乙酸固定，10min；放入纯水中即可。
3）固定  把胶卸下，做好起始记号，放入约80ml固定液（50ml无水乙醇，2.5ml冰乙酸，定容到500ml，冷藏）中在摇床上固定10min。
2. 染色  60ml染色液（0.75gAgNO3，溶入500ml水中，避光保存）+60µl甲醛，染色6min。蒸馏水洗涤一次。
3 显色  60ml显色液（7.5g NaOH，溶于500ml水）+120µl甲醛，放到摇床上显色至条带清晰。倒掉显色液，加蒸馏停止显色
4）将PAG板用去离子水洗二次，浸入10%乙醇和0.5%冰醋酸溶液固定6min。用去离子水洗两次，再浸入0.2%AgNO3溶液中10min，用去离子水洗3-5次，然后浸入1.5%NaOH和0.4%甲醛溶液中显色7min。最后，用0.75%%NaCO3终止显色。

求助各位，哪种方法比较好啊！谢谢！！！

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2013-05-23 12:02:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

点击这里搜索更多相关资源

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

相关版块跳转我要订阅楼主云中鸿雁的主题更新

返回列表