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talia01

禁虫 (初入文坛)

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bullfrog325

木虫 (正式写手)


talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-18 20:04:37
你怎么知道是BamHI没有切开的?
2楼2013-05-18 00:58:25
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-18 20:04:45
确定酶没有问题吗?是完全没有切动还是酶切不完全?是不是质粒加太多了?
3楼2013-05-18 06:18:08
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chenguestc

木虫 (职业作家)

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感谢参与,应助指数 +1
talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-18 20:04:54
请先确证另个酶是工作完好的,然后,查询两个酶的酶切温度以及反应BUFFER是否完全一致。
4楼2013-05-18 06:31:34
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talia01

禁虫 (初入文坛)

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5楼2013-05-18 09:41:34
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talia01

禁虫 (初入文坛)

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6楼2013-05-18 09:47:50
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

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talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-18 20:05:01
分步单酶切试试,用酶的最适合buffer
加油
7楼2013-05-18 11:09:00
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by talia01 at 2013-05-18 09:47:50
我查了,他们的buffer都是1*Buffer Tanbgo...

先确定酶是正常工作的,找个阳性对照进行单酶切。
8楼2013-05-18 13:04:26
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三撇五撇

银虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-18 20:05:09
怀疑是酶有问题,做单切对照
9楼2013-05-18 15:39:29
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chenzhu198

铁杆木虫 (著名写手)

版主

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-18 20:05:17
gyesang: 回帖置顶 2013-05-18 20:05:36
是不是XbaI酶切位点被甲基化了啊...这样就会切不开的
红砖并进,理实交融!
10楼2013-05-18 17:24:31
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