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木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:05:27

先用这两个内切酶分别对质粒做单酶切，看看能否切开。双酶切温度和buffer都得合适才行。。。

要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上

11楼2013-05-18 19:28:57

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铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:

5楼: Originally posted by talia01 at 2013-05-18 09:41:34
说实话还真不知道酶有没有问题，酶是两年前师姐用过的，而且现在就剩一点，可是实验室就是不给进新的...

酶只剩下一点，而且是保存时间很长了往往会有问题啊。还是新定酶比较保险。

12楼2013-05-19 03:09:58

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木虫 (正式写手)

Xba1的识别位点通常在菌体内会被甲基化处理，所以你用Xba1去切是切不开的，你可以将重组之后的质粒导入到Dam缺陷性菌株当中（如JM110），这样就可以切开了。

13楼2013-05-19 09:13:13

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