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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于双酶切
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talia01

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2013-05-17 17:15:39
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chenzhu198

铁杆木虫 (著名写手)

版主

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:05:17
gyesang: 回帖置顶 2013-05-18 20:05:36
是不是XbaI酶切位点被甲基化了啊...这样就会切不开的
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红砖并进，理实交融！
10楼2013-05-18 17:24:31
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普通回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:04:37
你怎么知道是BamHI没有切开的?
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2楼2013-05-18 00:58:25
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:04:45
确定酶没有问题吗？是完全没有切动还是酶切不完全？是不是质粒加太多了？
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3楼2013-05-18 06:18:08
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:04:54
请先确证另个酶是工作完好的，然后，查询两个酶的酶切温度以及反应BUFFER是否完全一致。
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4楼2013-05-18 06:31:34
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talia01

禁虫 (初入文坛)
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5楼2013-05-18 09:41:34
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talia01

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
6楼2013-05-18 09:47:50
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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talia01(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:05:01
分步单酶切试试，用酶的最适合buffer
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加油
7楼2013-05-18 11:09:00
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by talia01 at 2013-05-18 09:47:50
我查了，他们的buffer都是1*Buffer Tanbgo...

先确定酶是正常工作的，找个阳性对照进行单酶切。
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8楼2013-05-18 13:04:26
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三撇五撇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 20:05:09
怀疑是酶有问题，做单切对照
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9楼2013-05-18 15:39:29
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