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爱流浪的射手

银虫 (小有名气)

[求助] 长链多肽 RP HPLC

各位有合成过25个氨基酸的多肽吗?我最近合成了几条20个氨基酸以上(21, 26)的多肽,不仅产率、纯度上与15个氨基酸以下的短链没法比,HPLC 也很难得到漂亮的谱图,用HPLC纯化就更别提了。
各位有这方面的经验吗,你们用什么gradient跑这样的peptide呢。望不吝赐教!
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爱流浪的射手

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Greatben at 2013-05-15 08:10:12
首先得确立主峰,然后在主峰附近尽量拖缓梯度。。来回几次应该就差不多了。当然你可以试试换换流动相,色谱填料等等之类的

我现在用的C18柱,水和乙腈做流动相,但是目前都还没有明确的主峰,出来的峰都不是单一物质。
3楼2013-05-15 09:24:41
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-05-15 12:28:56
爱流浪的射手(红舟流星代发): 金币+5, 代扣代发金币 2013-09-30 21:41:47
首先得确立主峰,然后在主峰附近尽量拖缓梯度。。来回几次应该就差不多了。当然你可以试试换换流动相,色谱填料等等之类的
2楼2013-05-15 08:10:12
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流! 2013-05-17 20:06:39
爱流浪的射手: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-21 18:30:49
你得先确定你的产物在那个区间里,然后在针对这个区间做方法开发的。。。只能一步步的来
4楼2013-05-15 22:09:30
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prank

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-05-17 20:06:49
你这种情况最好换换树脂,ps基的长链后会出很多副反应。
5楼2013-05-17 14:51:59
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