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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 材料表征测试 » 长链多肽 RP HPLC
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爱流浪的射手

银虫 (小有名气)

[求助] 长链多肽 RP HPLC

各位有合成过25个氨基酸的多肽吗？我最近合成了几条20个氨基酸以上(21, 26)的多肽，不仅产率、纯度上与15个氨基酸以下的短链没法比，HPLC 也很难得到漂亮的谱图，用HPLC纯化就更别提了。
各位有这方面的经验吗，你们用什么gradient跑这样的peptide呢。望不吝赐教！
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1楼 2013-05-14 21:03:37
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-05-15 12:28:56
爱流浪的射手(红舟流星代发): 金币+5, 代扣代发金币 2013-09-30 21:41:47
首先得确立主峰，然后在主峰附近尽量拖缓梯度。。来回几次应该就差不多了。当然你可以试试换换流动相，色谱填料等等之类的
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2楼2013-05-15 08:10:12
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爱流浪的射手

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Greatben at 2013-05-15 08:10:12
首先得确立主峰，然后在主峰附近尽量拖缓梯度。。来回几次应该就差不多了。当然你可以试试换换流动相，色谱填料等等之类的

我现在用的C18柱，水和乙腈做流动相，但是目前都还没有明确的主峰，出来的峰都不是单一物质。
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3楼2013-05-15 09:24:41
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流！ 2013-05-17 20:06:39
爱流浪的射手: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-21 18:30:49
你得先确定你的产物在那个区间里，然后在针对这个区间做方法开发的。。。只能一步步的来
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4楼2013-05-15 22:09:30
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prank

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-05-17 20:06:49
你这种情况最好换换树脂，ps基的长链后会出很多副反应。
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5楼2013-05-17 14:51:59
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21kgtan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-05-20 11:39:23
爱流浪的射手: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-05-21 18:30:36
你先确认目的产物的出峰区间，然后做方法开发，分步纯化，每次去除一部分杂质
我曾经分离一个含2对二硫键的化合物，前后要更改4次流动相，才能把它纯化出来
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6楼2013-05-20 11:36:16
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qian11

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-06-07 20:29:08
主要还是你那边合成的不好
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7楼2013-06-07 12:00:24
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姜易遥

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 21kgtan at 2013-05-20 11:36:16
你先确认目的产物的出峰区间，然后做方法开发，分步纯化，每次去除一部分杂质
我曾经分离一个含2对二硫键的化合物，前后要更改4次流动相，才能把它纯化出来

请问出峰区间一般如何确认呢？

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8楼2018-05-18 00:01:21
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