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[求助]
碱性蛋白Native-PAGE
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| 现在老板让做蛋白的Native-PAGE，但是我们实验室之前没有人做这个，查资料又有好多地方不明白，不知道哪位大侠有这方面的经验，传授一下 |
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cicelyzh
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+2, 鼓励积极交流 2013-05-28 08:24:38
小丹木木: 金币+2, 鼓励积极交流 2013-05-28 08:24:38
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你做的酸性非变性胶是一种方法。就是注意要把电极反向连接。因为蛋白是带正电荷的，所以会向负极跑。 配方如下： 1. 分离胶：0.06M KOH，0.376M Ac，pH4.3（7.7%，丙烯酰胺：甲叉丙烯酰胺=37.5:1 ） 2. stacking胶：0.06M KOH，0.063M Ac，pH6.8（3.125%，丙烯酰胺：甲叉丙烯酰胺=3:1） 3. 电泳缓冲液：0.14M 2-丙氨酸，0.35M Ac，pH4.5 如果你要做的蛋白形成多聚体或者是分子量比较大，可以试试BN-PAGE。 |
8楼2013-05-26 14:50:33
stevenshi021
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2楼2013-05-14 10:14:07
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3楼2013-05-15 08:32:40
4楼2013-05-25 15:37:41
投票:
10