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全长基因表达，关于酶切位点，关于ORF
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| 我拿到的基因有2700bp左右，ORF大概在500-1900这个位置。我想表达这个基因，我该如何设计上下游引物，离ORF外测多远？还是越近越好？再弱弱的问一句：酶切位点是目的序列上本来就有还是设计引物的时候认为加上去的？ |
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【答案】应助回帖
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您是什么意思？表达基因？完整的基因？ 若是完整的基因，当然是整个ORF全长啦。从ATG到终止密码子这全部。就卡这一段，碱基必须一个不多一个不少。 在这，您这酶切位点是用来干嘛的？若是为以后连载体用的，就是在加在引物的5‘端之前。具体的方法你找找酶切引物设计方面的资料，上面肯定很详细的介绍如何设计。别忘了加保护碱基。。。  |
2楼2013-05-09 23:10:19
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zhaolf
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