| 查看: 2419 | 回复: 12 | |||
[求助]
TD-PCR做出来条带很多怎么办，求高人指点
|
|
本人新手，做微藻多样性的，最近开始做PCR，跟着一篇文献里的方法做。 文献里用的是TD-PCR，程序是这样说的“10 cycles of 94° for 15s，60 to 51° for 30s，72°for 2min。Followed by 25 cycles of 94° 15s，55°for 30 to 54s and 72° for 2min and final extension of 72° 7min”，如果我没理解错的话这句话的意思是前10个循环退火温度从60逐渐降到51，每个循环降1°，后25个循环退火温度为55°，但时间从30s逐渐增加到54s，每循环增加1s。 可是P出来的结果有很多条带，目的片段为1070bp，而跑胶跑出来有2000bp左右的，有1000bp左右的，还有900多bp左右的，而且那个1000多bp的跑出来也不齐，想请教前辈们有没有碰到过这种情况的，如何解决或者该往哪方面思考问题出在哪里。 引物是按文献合成的，Tm值分别为53.1和46，PCR体系也是按文献来的，用的酶也是同一公司的。  |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有150人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求高人指点我做的二茂铁 循环伏安曲线 的疑问？
已经有3人回复
- 求高人指点qpcr问题，扩增效率太高！
已经有14人回复
- 求高人指点:环境工程专业，做的却是分析，公务员考试怎么报？
已经有9人回复
- 求高人指点国外工程管理类的EI期刊比较好中的
已经有4人回复
- 今天遇见一数学题，做不来，求高人指点！
已经有7人回复
- 关于DMFDMA的反应，求高人指点
已经有21人回复
- 求高人指点《数字摄影测量学》这本书应该怎么学？
已经有7人回复
- 注塑加工PE100 断裂伸长率居然只有40多 求高人指点
已经有20人回复
- 求高人指点3Cr13在焊接后的回火温度是多少
已经有3人回复
- 圣诞前文章莫名其妙被拒，求高人指点该如何应对
已经有27人回复
- AFLP酶切连接 求高人指点啊
已经有11人回复
- 求高人指点用matlab求解非线性方程组，解决了追加100金币；
已经有11人回复
- 求高人指点：哪些建材期刊不收版面费啊？
已经有9人回复
- 拍了一个碳纤维板0°拉伸断面图，可是不知道如何分析，求高人指点迷津
已经有8人回复
- 重金求高人指点-法国公派读博签证办理
已经有5人回复
- Linux Gaussian09 无法安装。。求高人指点
已经有10人回复
- 求高人指点！！！食品类综述投稿？
已经有3人回复
- 求高人指点 鲁棒控制怎么学习
已经有17人回复
- 【求助】怎么抑制混凝土泛碱？求高人指点
已经有8人回复
- 求高人指点上海户口的问题
已经有10人回复
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
2楼2013-05-09 03:39:51
3楼2013-05-09 08:57:23
4楼2013-05-09 09:23:00
5楼2013-05-09 09:23:39
6楼2013-05-09 09:25:11
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2013-05-09 09:30:19
8楼2013-05-09 09:32:13
9楼2013-05-09 09:44:55
zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4351 (副教授)
- 金币: 9819.3
- 散金: 1
- 红花: 137
- 帖子: 65966
- 在线: 2445.6小时
- 虫号: 2227382
- 注册: 2013-01-07
- 性别: GG
- 专业: 人类营养
10楼2013-05-09 10:12:54
20