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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助双酶切切不开
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囧囧俏

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助双酶切切不开

将一个500bp的基因连到载体PET26b上，pcr结果阳性，酶切切不开，挑了好几个样都是如此，送去测序后证明基因在载体上
现在要将一个500的基因连在已有500片段的PET26上，又是切不开？
求解决方案！！谢谢各位
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1楼 2013-05-04 19:11:54
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意孤城_

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2013-05-05 15:08:01
测序后酶切位点没有突变...

你用的是哪些酶？
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12楼2013-05-06 11:26:56
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查看全部 22 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
说说你具体的酶切过程，用的是哪两个酶？
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-05-04 19:14:13
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senix

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 回帖置顶 2013-05-04 19:52:59
囧囧俏(amisking代发): 金币+1, 鼓励发帖交流！ 2013-05-04 19:53:07
测序结果有没有看那两个酶切位点序列是否正确？
或者，酶失活了，换新酶！
赞一下 回复此楼
做实验就是和上帝玩游戏！
3楼2013-05-04 19:46:06
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些酶切位点容易甲基化就会导致你说的这种情况，但是还是要看你的到底怎么回事，没说清楚
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-04 20:36:44
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查看全部 22 个回答
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