24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3622)
>虫友互识 (580)
>休闲灌水 (225)
>导师招生 (143)
>文献求助 (140)
>硕博家园 (65)
>论文投稿 (49)
>基金申请 (46)
>博后之家 (44)
>论文道贺祈福 (43)
>考博 (43)
>考研 (40)
>教师之家 (33)
>找工作 (29)
>招聘信息布告栏 (20)
>公派出国 (19)

返回列表

黄小怪

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 241.8
红花: 1
帖子: 17
在线: 43.5小时
虫号: 1501412
注册: 2011-11-20
性别: MM
专业: 药物分析

[求助] 如何提高核酸杂交特异性？（各位大神点点这）

问：如何提高核酸杂交特异性？
小白很急，请各位大神搭手相救

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

你必须非常努力，才能看起来毫不费力

1楼 2013-05-02 16:52:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

诸葛小汐

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 5447.1
红花: 1
帖子: 161
在线: 70.6小时
虫号: 1789711
注册: 2012-05-01
性别: GG
专业: 神经生物学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
黄小怪(gyesang代发): 金币+2, 非常好的建议！ 2013-05-04 01:32:51

首先引物设计上就要保证比较严格的配对，如果是文献里面的最好在NCBI做下BLAST，自己设计的推荐PP5和oligo评估下。在做PCR过程中，温度越高对引物特异性要求越高，一般都可以计算出引物的退火温度，做个梯度筛选出最好的。如果引物提高温度特异性仍旧不好，可以试着加少许DMSO等，这些东西可以提高引物特异性。小生不才，都是个人实验心得，欢迎交流指点

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

赞一下

回复此楼

2楼2013-05-04 01:10:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

黄小怪

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 241.8
红花: 1
帖子: 17
在线: 43.5小时
虫号: 1501412
注册: 2011-11-20
性别: MM
专业: 药物分析

引用回帖:

2楼: Originally posted by 诸葛小汐 at 2013-05-04 01:10:14
首先引物设计上就要保证比较严格的配对，如果是文献里面的最好在NCBI做下BLAST，自己设计的推荐PP5和oligo评估下。在做PCR过程中，温度越高对引物特异性要求越高，一般都可以计算出引物的退火温度，做个梯度筛选出最 ...

多谢诸葛童鞋！

偶第一次在上面发帖，不知道怎么样才能把金币给你，你看一下，如果没有，请告知我哈！

赞一下

回复此楼

你必须非常努力，才能看起来毫不费力

3楼2013-05-04 09:33:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主黄小怪的主题更新

返回列表