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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有没有用过台盼蓝觉得很不靠谱的同学啊？
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lamborghini_

铜虫 (正式写手)

[交流] 有没有用过台盼蓝觉得很不靠谱的同学啊？ 已有6人参与

RT，在实验中用过很多次台盼蓝了，但是一直觉得这玩意儿不靠谱，因为在显微镜下我根本就看不到染成紫色的细胞...  我看到的所有细胞都是透明的，偶尔会看到颜色不透亮细胞内有小颗粒的东西，但是细胞没有染成蓝色，也不知道算不算死细胞。   总之用了一个多月后的感觉就是台盼蓝不靠谱，无法计算死活细胞。   不知道朋友们都是怎么在用台盼蓝的？会不会有和我一样的感觉？
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1楼 2013-04-28 19:33:26
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edudiant

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不太清楚，还没上研

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-04-29 08:11:37
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xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
台盼蓝是染死细胞的，你没有看到就是没有死细胞了。
你多培养几天再染染看
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第三军团
3楼2013-04-29 10:55:43
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superxhj

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我最近也在用台盼蓝测细胞活力，也是感觉这个实验做到比较纠结：很多时候都染不上，有时候染上了，却发现被染的细胞在技术板上分布不均匀。以下是我的实验步骤：消化细胞，用PBS洗细胞一次，然后分别取20ul的细胞悬液与0.2%的台盼蓝混合，4min左右滴到血细胞计数板上在显微镜下观察。以下是我做的细胞图片：
很多情况下我做的实验结果都是如图528的图片，在此请高手指教：
为什么会染不上呢？我的实验步骤有错误的地方吗？
为什么有些同学的照片的背景是蓝色的？是怎么调的呢？
还有血细胞计数板的中间的凹槽到底是多少体积的呢？
有没有用过台盼蓝觉得很不靠谱的同学啊？
IMG_3528.JPG


有没有用过台盼蓝觉得很不靠谱的同学啊？-1
IMG_3527.JPG
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4楼2013-08-13 10:12:58
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
台盼蓝绝对靠谱，经典的方法！
你觉得不靠谱是你的方法有问题！！！
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5楼2013-08-13 20:37:22
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western虫

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-08-21 17:50:22
台盼蓝靠谱是不用质疑的。台盼蓝和细胞液1：1混合，背景应该是蓝的，不然就是台盼蓝太稀了，死细胞在短时间都能染上的。计数板上面一般都会标注格子大小，长宽1mm，高度0.1mm（四周的16个小方格组成的大格子），数16格取平均数，乘以10000就行。
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ForDream！
6楼2013-08-14 08:49:03
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superxhj

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by western虫 at 2013-08-14 08:49:03
台盼蓝靠谱是不用质疑的。台盼蓝和细胞液1：1混合，背景应该是蓝的，不然就是台盼蓝太稀了，死细胞在短时间都能染上的。计数板上面一般都会标注格子大小，长宽1mm，高度0.1mm（四周的16个小方格组成的大格子），数1 ...

首先非常感谢你有价值的回答！关于计数板计数，请恕我愚钝，如果四周的大格的体积是0.1立方毫米的话，那在计数的时候，应该是数四周大格细胞的数目，取平均，然后再乘以10000啊，为什么是16个小格呢？
另外，关于台盼蓝溶液的浓度，我是直接配置0.4%（w/v）的台盼蓝，使用的时候，是和细胞悬液1：1显色度，请问这个浓度是低了吗？
请不吝赐教，谢谢了

[ Last edited by superxhj on 2013-8-16 at 11:38 ]
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7楼2013-08-16 11:11:21
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western虫

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
7楼: Originally posted by superxhj at 2013-08-16 11:11:21
首先非常感谢你有价值的回答！关于计数板计数，请恕我愚钝，如果四周的大格的体积是0.1立方毫米的话，那在计数的时候，应该是数四周大格细胞的数目，取平均，然后再乘以10000啊，为什么是16个小格呢？
另外， ...

一个大格由16个小格组成嘛，原则上是数四周的数目取平均值乘以10000，但是就经验来看，同样时间，四个里选一个数目不多不少的，多次取样能更好的避免取样误差。0.4%的浓度是没问题的，1：1背景应该是蓝色，你那背景色我不太明白。看上去浓度没想象的高
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ForDream！
8楼2013-08-19 08:47:24
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zhangbighui

金虫 (正式写手)
★
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台盼蓝很经典的方法啊，没有染上是方法上哪有问题吧。看你的实验是在测细胞活力，细胞计数然后分析死活细胞比例吧，要以考虑用细胞计数仪来实现啊，这个快速还可靠。
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成功，就是成为你想成为的人
9楼2013-08-19 14:09:34
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superxhj

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by western虫 at 2013-08-14 08:49:03
台盼蓝靠谱是不用质疑的。台盼蓝和细胞液1：1混合，背景应该是蓝的，不然就是台盼蓝太稀了，死细胞在短时间都能染上的。计数板上面一般都会标注格子大小，长宽1mm，高度0.1mm（四周的16个小方格组成的大格子），数1 ...

对了，你好，请问你配好台盼蓝后再过滤掉时候，是用多大滤径的滤膜过滤的呢？谢谢！
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10楼2013-08-21 15:06:47
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