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7baby1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 16srRNA基因PCR扩增条带总出现在最下方什么原因?

是鱼类腐败细菌,引物为通用引物27F和1492R,出现这样的情况是什么原因?求高人解答
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7baby1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-29 00:30:36
DNA如果可能的话最好可能定一下大致的浓度。模板太多或者太少都对PCR的结果影响很大。用的是基因组DNA吗?nanodrop很容易测的,不行的话跑胶也可以检测到微克级别的基因组DNA。
此外,引物浓度一般是10μM=10pmol ...

引物浓度我写错了,就是10pmol/ul
12楼2013-04-29 14:31:12
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

什么情况,图呢?
2楼2013-04-28 03:19:53
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7baby1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-28 03:19:53
什么情况,图呢?

不知道如何插图
3楼2013-04-28 12:50:27
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7baby1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-28 03:19:53
什么情况,图呢?

DNA2ul,buffer2.5ul,mgcl 2ul,dNTP 2ul ,上游引物3ul,下游引物3ul,taq酶0.3ul,双蒸水10.2ul,总体积25ul,94℃5min,94℃1min,55℃1min,72℃2min,72℃后续延伸10min

2.JPG

4楼2013-04-28 12:58:18
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