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709397457

银虫 (小有名气)

[求助] 如何做细菌生长曲线

请问大家如何做OD值与细菌数之间的生长曲线?
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雨
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangxingc: 金币+2, 鼓励积极应助,欢迎常到微生物版 2013-04-26 08:49:57
1.活化菌种:-20度或者-80冻存的菌最好活化2次,4度的活化1次就够了,长到对数期时开始实验
2.调菌浓:用酶标仪或者分光光度计测OD,把待测的几株菌浓度调一致。(要是只有一株那就没必要了,不过测个OD也没坏处,自己对菌浓有个了解也方便后面的实验)
3.把调好的菌液接种到新鲜培养基中,混匀,分装若干管(看你要测多少个时间点就分多少管,最好再留出两三管备用的,如果不放心也可以每个时间点留2管),恒温箱培养(需氧还是厌氧就看是什么菌了)。记得留一些空白培养基,测OD时做空白对照。
4.每个时间点取出一管混匀(一般是间隔2h,看你自己的需要吧),测OD,如果需要也可以测pH。

具体每个环节菌液调到什么浓度,加多少,就得看具体是什么菌了,没法一概而论。
测生长曲线还是挺辛苦的。。。。有时还要通宵-。-
争做医生中最好的厨子
2楼2013-04-25 23:40:12
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
709397457: 金币+1, ★有帮助 2013-04-27 21:53:04
用试管做,比如你想2h取一次样,每次取样做3个重复,连续跟踪36h,那么可以这样设计:
① 取54根试管,每一个试管都接相同的菌悬液(一级种子液);
② 摇床摇,每2h取走3根,其他的接着摇,取走的就不要放回去了。

其他的什么一级种子液什么的,我想你应该懂。这个思路主要是避免染菌,操作还方便,快速。。培养时,请务必倾斜,70°左右就行了。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
3楼2013-04-26 17:42:06
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