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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我这样算是在构建cDNA文库吗？
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随波逐刘

新虫 (小有名气)

[求助] 我这样算是在构建cDNA文库吗？

植物组织总RNA中分离得到了mRNA，用M-MLV RTase cDNA Synthesis Kit（TAKARA）直接合成双链cDNA，用cDNA PCR Library Kit（TAKARA）加接头，扩增了这些ds cDNA，PCR产物纯化后直接和T载体连接，转到大肠杆菌里培养，筛选。请问，这样子，算是构建了cDNA文库吗？
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1楼 2013-04-21 16:36:14
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panyuzhu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2013-04-21 17:18:21
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随波逐刘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by panyuzhu at 2013-04-21 17:18:21
是要炫耀还是咋的，你都已经做了

额，还没做呢，只是这样想的。这样子的试剂盒才2000左右，看文献上一般用SMARTER，要1w，不知道这样子行不行。。。
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3楼2013-04-21 17:24:34
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最近也要做cDNA文库，现在很纠结，不知道用那个kit，想自己买试剂做，又不知怎么搭配，不知楼主的方法可否？
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4楼2013-07-10 16:55:02
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问楼主，你做了吗？结果怎么样了？请赐教啊，
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5楼2013-07-10 16:56:09
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

文库是不是还要质量检测什么的一下，算算滴度什么的，貌似？
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6楼2013-07-10 18:35:58
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随波逐刘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hyphen007 at 2013-07-10 18:35:58
文库是不是还要质量检测什么的一下，算算滴度什么的，貌似？

正在进行呢，在酶切上卡住了，伤不起
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7楼2013-07-11 08:36:33
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匿名

用户注销 (小有名气)
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8楼2013-10-16 19:51:10
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随波逐刘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zq191236086 at 2013-10-16 19:51:10
您好，我最近也要构建cDNA文库，也不知要买什么试剂盒，请问你现在怎么做的，买的什么试剂盒啊？
    我现在和当时你的心情一样，请赐教啊。浪费你的时间了，真的很感谢您...

我做的是消减杂交cDNA文库，已经结束了。。。差减杂交购买的是clontech的试剂盒，分离mRNA买的是promega的磁力架分离系统，后面都是小东西，胶回收试剂盒、质粒载体都是promego的产品，不贵质量也挺好！
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9楼2013-10-17 10:20:19
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文库构建

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这么多做C库的，有没有做BAC文库的啊，一起探讨一下。
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10楼2013-10-28 11:51:02
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