| 查看: 857 | 回复: 2 | ||||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
shiysh主管区长
|
[求助]
关于免疫组化（IHC）的问题
|
|||
| 前几天做IHC，用的一抗分别抗小鼠和抗兔的，各五个抗体。结果小鼠的抗体全都没有表达，兔子的全部表达了。理论上应该是无论是抗小鼠还是抗兔都表达的。因为是之前的block，从新切的片，本来是打算拿来做positive control的。刚开始以为是二抗出了问题，今天换了一个kit，发现依旧是小鼠的抗体都不表达，兔子的都表达。感觉很是诡异。请问各位大侠是什么原因？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 | 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有77人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关免疫组化的问题
已经有4人回复
- 免疫组化中的问题
已经有5人回复
- 请教关于脑组织发育过程的问题
已经有4人回复
- python urllib2 求助阿
已经有7人回复
- 免疫组化与免疫荧光方法及常见问题分析
已经有325人回复
- 我搜集的一些关于免疫组化的文档
已经有89人回复
- 免疫组化染色机什么牌子的比较好
已经有1人回复
- 【求助】两个实验问题，求牛人指教（细胞培养和免疫组化，赠金币）
已经有8人回复
- 【转帖】免疫组化技术资料大全：原理、步骤、注意事项、教程及常见问题解答
已经有25人回复
- 免疫组化IgG作为阴性对照的问题？
已经有6人回复
凌波丽
禁虫
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, MolEPI+1, 应助指数+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-21 16:08:53
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 学习了 2013-04-21 18:21:38
shiysh: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-04-22 01:43:39
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, MolEPI+1, 应助指数+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-21 16:08:53
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 学习了 2013-04-21 18:21:38
shiysh: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-04-22 01:43:39
|
这个问题可能是与影响抗原免疫应答的因素有关： 包括抗原分子的理化因素、的宿主因素和抗原进入动物机体的方式三方面。 1.抗原分子的理化因素 化学性质、分子质量大小、结构复杂性、易接近型、聚合状态还是单体状态。 2.宿主因素 （1）遗传因素：各种物种的不同，同一物种不同个体，对同一抗原的免疫应答与是否免疫应答的程度不同。而且在各种遗传因素中，NHC是涉及到免疫应答的质和量的最主要因素。 （2）同一物种不同个体的年龄、性别与健康状况也对免疫应答的质和量有影响。一般地，青壮年动物对免疫应答的质和量高，雌性动物比雄性动物生成的抗体多。 3.抗原进入动物机体的方式 （1）抗原进入动物机体的数量：抗原的剂量要适中，剂量太高或者太低都会诱导免疫耐受。 （2）免疫途径：按免疫应答强度从高到低，皮内免疫>皮下免疫>腹腔注射=静脉注射。 （3）两次免疫之间的时间间隔和次数。 （4）使用免疫佐剂：弗氏试剂诱导IgG类抗体产生；明矾试剂诱导IgE类抗体产生。 这些原理你可以参考，然后调整你的protocols. Good Luck ! |
2楼2013-04-21 14:43:46
凌波丽
新虫
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
3楼2013-04-21 14:49:54
