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cjf-88

银虫 (初入文坛)

[求助] Not I/BamH I双酶切体系缓冲液的选择问题

如题,查了Takara中Double Digestion(双酶切反应)时Universal Buffer(通用缓冲液)的使用表,Not I/BamH I双酶切体系通用缓冲液为:0.5×K+BSA,Not I 酶一般反应体系中的0.1% TritonX-100还用不用加? 假如在20μl反应体系中,有10×K Buffer,0.1% BSA ,0.1% TritonX-100,各试剂应加多少量?
  麻烦大家了!
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艾小颠

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cjf-88 at 2013-04-22 17:58:35
BSA加的量不是很理解,下面第一个图是Not I 说明书中的一般反应体系,第二个图是Double Digestion(双酶切反应)时Universal Buffer(通用缓冲液)的使用表中的一段说明:


这个体系内10x buffer加2ul是将buffer稀 ...

您好!宝生物的not1 你们酶切一般多长时间呢?
13楼2013-10-23 10:32:03
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cjf-88

银虫 (初入文坛)

求帮助啊!谢谢大家了!
2楼2013-04-21 16:04:27
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senix

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-22 08:49:34
cjf-88: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-04-28 23:25:39
不用加,直接用Universal Buffer(通用缓冲液),不用加0.1% TritonX-100!
做实验就是和上帝玩游戏!
3楼2013-04-21 21:21:45
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cjf-88

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by senix at 2013-04-21 21:21:45
不用加,直接用Universal Buffer(通用缓冲液),不用加0.1% TritonX-100!

谢谢!请问20μl反应体系中10×K Buffer是加1μl吧?那0.1% BSA 是加2μl还是1μl?
4楼2013-04-21 22:28:25
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