| 查看: 896 | 回复: 3 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于酵母双杂交的一些问题
|
||
| 本人想做酵母双杂家，现有蛋白A，A-AD和A-BD的载体我都有，现在想验证一下蛋白A分别和B， C，D，E之间是否有相互作用。我该用A-AD和其他蛋白连接BD去做，还是应该A-BD 和其他蛋白连接BD去做？有什么不同嘛？请牛人给予详细的解答，谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
A期刊撤稿
已经有5人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有8人回复
-
26申博自荐
已经有7人回复
-
想换工作。大多数高校都是 评职称时 认可5年内在原单位取得的成果吗？
已经有4人回复
-
带资进组求博导收留
已经有9人回复
-
求助大佬们，伤口沾上了乙腈
已经有6人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 空质粒双酶切后大小不对，纠结！
已经有11人回复
- 蛋白水解酶蛋白可以做酵母双杂交吗？
已经有6人回复
- 【求助】如何探究两个蛋白质之间的直接或间接相互作用？谢谢！
已经有6人回复
- 酵母双杂-转完质粒的酵母在一缺液体培养基上不长？？？
已经有8人回复
- 酵母双杂交手册
已经有206人回复
- 酵母双杂交用X-gal显色要注意哪些事啊！
已经有9人回复
- 报告基因
已经有6人回复
- 【求助/交流】请问酵母双杂交所需的试剂哪家公司的比较好，有没有具体的货号
已经有9人回复
- 【求助/交流】请求帮助 关于酵母双杂交
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于酵母双杂交的问题
已经有4人回复
zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4351 (副教授)
- 金币: 9924.3
- 散金: 1
- 红花: 137
- 帖子: 65921
- 在线: 2433.7小时
- 虫号: 2227382
- 注册: 2013-01-07
- 性别: GG
- 专业: 人类营养
3楼2013-04-14 16:01:22
zyx335588
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 6713.2
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 459
- 在线: 417.5小时
- 虫号: 990100
- 注册: 2010-04-06
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wchuangqi: 金币+10 2013-04-15 01:25:45
感谢参与，应助指数 +1
wchuangqi: 金币+10 2013-04-15 01:25:45
| 首先要测试你的A.B.C.D.E是否有自激活活性，如有则只能将其连到AD载体上了，相应的另一个蛋白连到BD上。如果均没有自激活现象，个人觉着两者没有太大区别。如果可能就将两个都做了，毕竟融合后的结构是否发生变化不好说，加上其它因素，所以双杂的结果一般还需要其它实验进一步证实。要想偷点儿懒的话就将诱饵A连到BD上，其它的连到AD上，这样只需测试A的自激活即可，如果比较幸运，其它的自激活测试就不用做了。其实好多配套的AD和BD载体的多克隆位点很相似，因此我做的时候都是同一个蛋白同时连这两个载体，以备不时之需。 |
2楼2013-04-14 15:42:24
4楼2013-04-15 01:26:09