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葡萄糖苷酶的保存问题
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| 我购买的酶是50u/mg，所需的浓度是0.5u/ml，因为实验室也没有人做过酶方面的实验，查阅文献中只是涉及实验步骤，鲜少提到实验技巧方面的，所以一直都在摸索条件。一开始我是取1mg把其溶于10ml的容量瓶中，保存在4度冰箱中，每次用的时候取100ul稀释十倍来用。可是做了一段时间之后，发现酶活性降低很多。经过查阅资料，就将酶用ph 6.8的磷酸缓冲溶液配好（1mg溶于100ml），准备放于-20度保存，我是在刚配好，分装好（20min后），以及第二天从冰箱中拿出，测了其吸光值，三次吸光值分别是0.456, 0.372, 0.071，总之酶活性不断降低。我也看了一些蛋白质保存的方法，我想失活的原因在于，我保存时的浓度过低，没有加保护剂，酶在低温结构被破坏了。因为酶还是有点贵的，我希望用过这种酶的各位同仁能帮帮忙，指点一下是如何保存的，万分感谢！ |
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