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spring050403金虫 (正式写手)
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硅胶柱的麻烦
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最近过了一根硅胶柱，出现了很多问题，搞不明白怎么回事儿，再次请教各位大虾： 样品点板就一个长的点，正己烷和乙酸乙酯梯度洗脱，正己烷的产物是粘稠的淡黄色，用正己烷做展开剂跑TLC刚刚好一个椭圆的点（极性再大就跑没了，试过石油醚，一样效果），之后打进GC-MS分析，基线漂移严重（和GC-MS应该问题不大，因为检测过多次了，做别的都好），大约有百十来个峰，峰的大小基本相同，谱库对比，里面竟然还有很多脂肪酸，多元醇，长链烃类，UV检测也是一大堆大小相似的峰。 试问我这是怎么回事？以下该怎么办？ 问题出现的比较多哈，有经验的帮忙解释下吧！  |
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laiyin_111
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
spring050403: 金币+30, ★★★很有帮助, 我的样品就是正己烷萃取的啊，可能里面都是油脂的东西。那也不至于跑过一根柱子，就一个点，还一点都没分开吧？而且除了正己烷，石油醚真找不到合适的展开剂了。HPLC可能是紫外值不对，没有吸收峰，打算试试凝胶色谱呢。 2013-04-10 22:47:41
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-04-12 16:57:46
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spring050403: 金币+30, ★★★很有帮助, 我的样品就是正己烷萃取的啊，可能里面都是油脂的东西。那也不至于跑过一根柱子，就一个点，还一点都没分开吧？而且除了正己烷，石油醚真找不到合适的展开剂了。HPLC可能是紫外值不对，没有吸收峰，打算试试凝胶色谱呢。 2013-04-10 22:47:41
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-04-12 16:57:46
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你的样品脂溶性的成分多，而且拖尾严重，在上柱子之前你可以尝试着再处理一下样品，譬如将样品用石油醚萃取一下脱脂，然后再TLC跑板选择合适的系统和展开条件。 刚开始不成点拖尾的样品经过几次过柱子处理之后点也会慢慢清楚的。 选择合适的系统很重要。你还可以尝试着跑LH-20或MCI或反相柱看看。 |
2楼2013-04-10 08:27:44
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感谢参与，应助指数 +1
spring050403: 金币+30, ★★★很有帮助, 我觉得拖尾好解决，问题是后面的一大堆！石油醚和正己烷的极性差不多，应该都可以吧！ 2013-04-10 22:51:14
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-04-12 16:58:03
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spring050403: 金币+30, ★★★很有帮助, 我觉得拖尾好解决，问题是后面的一大堆！石油醚和正己烷的极性差不多，应该都可以吧！ 2013-04-10 22:51:14
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-04-12 16:58:03
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3楼2013-04-10 09:23:37
laiyin_111
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【答案】应助回帖
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jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-04-12 16:58:10
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-04-12 16:58:10
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没有其他可选方法时，你就不停地上几遍硅胶柱，尝试着大砍断，硅胶也有除脂脱色素等功能从而可以将拖尾物质慢慢去除，一般来说渐渐地就可以看到点了。我以前分的植物是油脂很多的，是种子类提取物，看不到点就不停地粗分大砍断，就是这样走过来的。 此外，多查阅你这个样品的文献，看看别人是采取怎样的方法进行分离的。再结合实践过程自己多思考多摸索。 还有一个问题，换一个显色剂看看，我碰到过的样品硫酸乙醇显色均是黄色条带，但是换用了香草醛显色之后五颜六色都出来了。 多查，多分析，多观察，多思考。 祝你好运啊！ |
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spring0504034楼2013-04-11 08:33:12
【答案】应助回帖
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spring050403: 金币+30, ★★★很有帮助 2013-04-16 06:11:06
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正己烷和乙酸乙酯系统对于小极性成分的成点性还是可以的。小极性部分拖尾可能为：酸性化合物，色素，点样量过大，展开系统。你可以减小点样量或将样品稀释后跑板试试看，因为点样量太大也可能导致拖尾。若为色素影响，肉眼就可分辨出，5g样品可以直接过凝胶，但是对于小极性部分，色素可能和样品一共洗脱，凝胶效果不一定好。 对于正己烷冲下来的部分，因为极性太小，用普通制备薄层很难分开，可以尝试下正相柱，不过这么小的极性，分开的可能性也不大，通常对于这么小极性的分离，采用分馏法，但你的样品量显然不太适合。 至于其他部分，正常洗脱就行了。粗分的时候不用砍太多断，但是最好每断之间重合的部分不要太多。 |
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6楼2013-04-12 16:36:15
hexiaoyang119
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