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huangk1199

木虫 (正式写手)

[求助] Blast 细菌比对各种疑问,求解

我研究的蚯蚓方向,微生物方向新手,第一次测序后,Blast比对,现有以下不解,求解答。
1、测序样本在blast中比对,有一半的样本同源性低于90%,并且有三个样本直接无法鉴定,blast出现error,why?
2、为什么NCBI和DDBJ中的比对结果差异巨大?
3、对于有些样本,一个基因序列在blast比对后有十几个菌种的同源性均为100%,请问如何筛选出最佳的匹配菌种?
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一路蚯蚓
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lmhzy1987

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huangk1199: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-08 10:17:46
不知道你测序的片段多长,如果你用的引物是16S引物,并且你测序的一段序列刚好是位于保守区的话,100%的同源性是没什么太大意义的,error这种问题应该是你的序列格式里有些非法字符吧,好好检查下格式
头疼的文库
5楼2013-04-07 16:55:06
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huangk1199

木虫 (正式写手)

自己帮自己顶一个。
一路蚯蚓
2楼2013-04-06 08:36:05
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taoqi1986918

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-04-07 13:58:36
huangk1199: 金币+1, 有帮助 2013-04-08 10:17:18
这个要看每个参照序列的覆盖率以及序列的详细信息,一般会有介绍的e
耐得住寂寞才能拥有繁华!
3楼2013-04-06 09:43:02
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liuyi8203

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-04-07 13:59:11
huangk1199: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-08 10:17:35
第一问:如果你的测序结果正确可信的话(看看峰图),你很可能发现新种了,不然就是你的测序结果有问题,blast出现error没遇到过。
第二问:没用过DDBJ,不乱说。
第三问:这十几个种都属于同一个属吗?如果都属于,16或18S的分辨率就只能这样了,结合形态学、生理生化试验或设计特异引物进一步鉴定;如果不属于,建议重新设计引物以提高特异性。
4楼2013-04-07 09:58:43
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