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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 过凝胶柱怎么选择洗脱剂
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miaomiaomao

金虫 (小有名气)

[交流] 过凝胶柱怎么选择洗脱剂

各位大侠帮帮忙
本人的样品易溶于水，微溶于甲醇，之前试过ODS柱，洗脱系统为甲醇-水，但是分离效果不好，在前面几管就几乎全下来了，现在打算试试凝胶柱，该选择什么洗脱剂呢？如果选用磷酸盐缓冲液，那该怎么配制呢？浓度多少？pH多少？
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1楼 2013-04-02 11:02:43
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顺风顺水

铜虫 (初入文坛)
★ ★
miaomiaomao(金币+2): 谢谢参与
豆哥: 金币+1, 谢谢 2013-04-03 09:46:22
0.01PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)
关键还得看你的物质在何种缓冲液稳定 PH多少。你用的什么凝胶 葡聚糖  琼脂糖 还是纤维素 基本上都是分子赛，有的还有点反向作用。如果分不开，那就用反向层析树脂试试或者离子交换层析树脂试试，或者两个一块用，基本上水溶性的物质都能搞定了，欧了。
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2楼2013-04-02 12:48:19
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miaomiaomao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 顺风顺水 at 2013-04-02 12:48:19
0.01PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)
关键还得看你的物质在何种缓冲液稳定 PH多少。你用的什么凝胶 葡聚糖  琼脂糖 还是纤维素 基本上都是分子赛，有的还有点反向作用。如 ...

谢谢！我也不清楚我的物质在什么条件稳定，有没有通用的一种洗脱剂？哪种凝胶对我的样品分离效果会好点？唉，我现在才刚入门，懂得太少了
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3楼2013-04-02 15:50:02
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fyz7232

木虫 (知名作家)
★
miaomiaomao(金币+2): 谢谢参与
不是特别清楚
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5楼2013-04-03 08:41:20
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wwwtony

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
miaomiaomao(金币+2): 谢谢参与
PSA: 金币+1, 谢谢交流，常来哦 2013-04-03 11:29:55
你的样品是什么类型的，可能极性比较大，反相不能保留，薄层展开有点吗，考虑先用MCI砍段，水溶后样品直接上样，甲醇水系统梯度洗脱，然后用分水溶性成分的凝胶纯化后，用高效液相制备。
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6楼2013-04-03 09:34:05
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huaqiangliu

新虫 (小有名气)
★
miaomiaomao(金币+2): 谢谢参与
引用回帖:
6楼: Originally posted by wwwtony at 2013-04-03 09:34:05
你的样品是什么类型的，可能极性比较大，反相不能保留，薄层展开有点吗，考虑先用MCI砍段，水溶后样品直接上样，甲醇水系统梯度洗脱，然后用分水溶性成分的凝胶纯化后，用高效液相制备。

.回答的有点矛盾了
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7楼2013-04-03 10:14:44
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顺风顺水

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PSA: 金币+1, 鼓励新虫，常来哦！ 2013-04-03 11:30:06
同意五楼说的中间部分，用SKP-10-4300 或MCI进行分离。再用反向硅胶或离子交换层析树脂试试咯。好运
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8楼2013-04-03 11:02:13
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miaomiaomao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by huaqiangliu at 2013-04-03 10:14:44
.回答的有点矛盾了...

大侠有什么指点？
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9楼2013-06-20 11:55:20
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miaomiaomao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wwwtony at 2013-04-03 09:34:05
你的样品是什么类型的，可能极性比较大，反相不能保留，薄层展开有点吗，考虑先用MCI砍段，水溶后样品直接上样，甲醇水系统梯度洗脱，然后用分水溶性成分的凝胶纯化后，用高效液相制备。

我的极性是比较大，不是说极性大的用反相吗？可是也不见有什么分离效果。薄层展开没什么点，大多数呈线。
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10楼2013-06-20 11:57:06
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tanbingxin

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我最近也想用凝胶分离东西，分的东西极性比较小。硅胶点板，10%甲醇-氯仿系统两个点展的很开。因为样品很少只有10几mg，想用凝胶分。不知道怎么选洗脱液啊!求助。。。。。
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11楼2015-03-28 12:33:41
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syhorchid4楼
2013-04-03 03:19   回复  
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