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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

MolEPI: 1
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专业: 中药资源

[交流] 引物酶切位点问题已有6人参与

大家好，我要做克隆表达，但是设计的引物没有加酶切位点，做TA克隆的话会不会比较麻烦？有没有比较好的方法改进啊？一般克隆载体大家用什么载体啊？还有表达载体大家又用什么呢？

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思路决定出路。。。

1楼 2013-04-01 14:11:45

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

紫藤玲珑

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 30.5
帖子: 15
在线: 6.2小时
虫号: 2175839
注册: 2012-12-09
专业: 其他病原微生物及感染与宿

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

15楼: Originally posted by dulei at 2013-04-09 11:22:49
只要不加酶切位点时上下游引物的长度和GC含量差不多就可以。最好不要有错配，尤其是3‘端。发卡结构和二聚体影响不大（看看ΔG值，绝对值不要太大，一般10以下都能接受）。

加上酶切位点后，可以不考虑错配、发 ...

我看premier5上面的我的△G基本都是-30多，